Anti-RAB14 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P61106

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RAB14-Funktion und Lokalisierung

• RAB14 ist ein Mitglied der Rab-Familie kleiner GTPasen, die als Schlüsselregulatoren des intrazellulären Membrantransports von der Vesikelbildung bis zur Membranfusion fungieren.
• Das Protein zirkuliert zwischen einer inaktiven GDP-gebundenen Form und einer aktiven GTP-gebundenen Form, die nachgeschaltete Effektoren rekrutiert, die für Vesikelbildung, -bewegung, -verankerung und -fusion essentiell sind.
• RAB14 ist am Membrantransport zwischen dem Golgi-Komplex und Endosomen während der frühen Embryonalentwicklung beteiligt.
• Es reguliert den Golgi-zu-Endosom-Transport von FGFR-haltigen Vesikeln, ein Weg, der für die Basalmembranablagerung und die Differenzierung der Epiblasten-/primitiven Endoderm-Linie entscheidend ist.
• Zusammen mit seinem Guanosin-Nukleotid-Austauschfaktor DENND6A kontrolliert RAB14 den endozytischen Transport von ADAM10, das Shedding von N-Cadherin/CDH2 und die Zell-Zell-Adhäsion.
  Verwandte Referenzen: PMID:22595670
• RAB14 vermittelt die endosomale Verankerung und Fusion durch Interaktion mit RUFY1 und RAB4B.
  Verwandte Referenzen: PMID:20534812
• Eine Interaktion mit RAB11FIP1 deutet auf eine mögliche Rolle bei der Neuritenbildung hin.
  Verwandte Referenzen: PMID:26032412
• RAB14 lokalisiert zu recycelnden Endosomen, frühen Endosomenmembranen, dem Golgi-Apparat, dem trans-Golgi-Netzwerk, zytoplasmatischen Vesikeln und Phagosomen. Es unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Methylierung und Prenylierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogen-Sequenz (Aminosäuren 39 – 140 von humanem RAB14) liegt in einer Region, die bei der Maus konserviert ist, was wahrscheinlich die beobachtete Kreuzreaktivität erklärt. Überprüfen Sie bei der Versuchsplanung die Sequenzausrichtung für nicht aufgeführte Spezies.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 24 kDa, aber posttranslationale Modifikationen oder Proteinkomplexe können die scheinbare Wanderung verschieben. Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen (z. B. humane oder murine Zelllysate) und ziehen Sie reduzierende/denaturierende Bedingungen in Betracht.
• Bei ELISA kann die polyklonale Natur eine hohe Sensitivität bieten. Optimieren Sie das Beschichtungsantigen und die Antikörperverdünnung; die Verwendung des Antikörpers als Capture-Reagenz in Kombination mit einem anderen Detektionsantikörper kann den Hintergrund reduzieren.
• Polyklonale Antikörper können Chargen-zu-Chargen-Variationen aufweisen. Für kritische oder quantitative Assays ist es ratsam, mehrere Chargen zu testen und Standardarbeitsanweisungen zu etablieren.
• Sorgen Sie für eine angemessene Probenvorbereitung und Blockierschritte, um unspezifische Bindung zu minimieren, insbesondere bei der Arbeit mit komplexen biologischen Matrizes.

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