Anti-Rab12 Kaninchen monoklonaler Antikörper [KO validiert] für WB und ELISA - Q6IQ22

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Rab12-Funktion und -Lokalisierung

• RAB12 ist ein Mitglied der Ras-Superfamilie kleiner GTPasen und wirkt als molekularer Schalter, der zwischen inaktiver GDP-gebundener und aktiver GTP-gebundener Konformation zyklisch wechselt, um den intrazellulären Membrantransport zu regulieren.
• Es spielt eine Rolle beim Transport von Proteinen von Recycling-Endosomen zu Lysosomen und erleichtert den Abbau von Fracht wie dem Transferrin-Rezeptor.
• RAB12 beteiligt sich an der Autophagie, lokalisiert sich an autophagosomalen Membranen und beeinflusst autophagische Prozesse.
• Auf subzellulärer Ebene wird RAB12 auf Membranen von Recycling-Endosomen, Lysosomen, dem Golgi-Apparat und autophagischen Vesikeln gefunden.
• Das Protein unterzieht sich wichtigen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Prenylierung für die Membranverankerung sowie Phosphorylierung und Acetylierung.
• Als GTPase bindet RAB12 Guanin-Nukleotide und Magnesiumionen, die für ihre enzymatische Aktivität wesentlich sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt das全长-menschliche Rab12-Protein (aa 1-244) ab, was darauf hindeutet, dass der Antikörper natives Rab12 in Western Blot und ELISA-Anwendungen erkennen kann; validieren Sie dies mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen in Ihrem spezifischen Probensystem.
• Für den Western Blot sollten Sie Lysate aus menschlichen und murinen Zelllinien (z. B. HeLa, NIH/3T3) und eine Knockout-Kontrolle in Betracht ziehen, um die Spezifität zu bestätigen, angesichts der Bezeichnung [KO validiert].
• Im ELISA titrieren Sie den Antikörper gegen rekombinantes Rab12-Protein, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen, und fügen Sie eine Standardkurve für semi-quantitative Analysen hinzu.
• Aufgrund der Bivalenz des Antikörpers kann die Leistung im direkten ELISA eine Vorbeschichtung mit rekombinantem Antigen erfordern; erwägen Sie das Testen indirekter Formate für eine bessere Empfindlichkeit.
• Rab12 hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von 27 kDa; bestätigen Sie die Bandenwanderung beim erwarteten Gewicht unter reduzierenden Bedingungen und berücksichtigen Sie mögliche posttranslationale Modifikationen, die zu geringfügigen Verschiebungen führen können.

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