Anti-RAB11B-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q15907

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: RAB11B-Funktion und -Lokalisierung

• Ras-verwandtes Protein Rab-11B (RAB11B), auch bekannt als GTP-bindendes Protein YPT3, ist ein Mitglied der Ras-Superfamilie kleiner GTPasen. Es wechselt zwischen einem GDP-gebundenen inaktiven und einem GTP-gebundenen aktiven Zustand und fungiert als molekularer Schalter im intrazellulären Membrantransport.
  Verwandte Referenzen: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B ist ein Schlüsselregulator des endozytischen Recyclings und steuert das apikale Recycling von Transmembranproteinen wie CFTR, ENaC, Kaliumkanälen und spannungsabhängigen L-Typ-Calciumkanälen. Es steuert auch konstitutive und regulierte Sekretionswege, einschließlich der Exozytose von Insulingranula.
  Verwandte Referenzen: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• Das Protein ist für den Melanosomtransport und die Freisetzung aus Melanozyten unerlässlich und moduliert den intrazellulären Transport von V-ATPase als Reaktion auf extrazelluläre Azidose.
  Verwandte Referenzen: PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11B fördert die Ciliogenese durch Bildung eines cilären Zielkomplexes mit Rabin8/RAB3IP, ASAP1, RAB11FIP3 und ARF4, was den vesikulären Transport zur Mutterzentriole erleichtert. Umgekehrt unterbricht die durch LPAR1-Signalvermittlung vermittelte Phosphorylierung von WDR44 diesen Komplex und hemmt das Cilienwachstum.
  Verwandte Referenzen: PMID:25673879, PMID:31204173

• Zusätzlich interagiert RAB11B mit RABL3, um die Bildung von cilären Vesikeln voranzutreiben, was seine vielseitigen Rollen bei der Montage der primären Cilie unterstreicht.
  Verwandte Referenzen: PMID:36052645

• Subzellulär ist RAB11B vorwiegend mit Membranen von Recycling-Endosomen assoziiert, findet sich aber auch auf zytoplasmatischen Vesikeln, sekretorischen Vesikeln, synaptischen Vesikelmembranen und Phagosomenmembranen, was seine dynamischen Transportfunktionen widerspiegelt.

• Posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Citrullinierung, Methylierung und Prenylierung, regulieren seine Aktivität, Lokalisierung und Proteininteraktionen. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und Mutationen werden mit geistiger Behinderung in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 100–200 von humanem RAB11B umfasst und in einer Region liegt, die wahrscheinlich über Arten hinweg konserviert ist, was mit der berichteten Kreuzreaktivität zu Maus und Ratte übereinstimmt. Dieses peptidbasierte Design kann sowohl denaturierte als auch native Proteinkonformationen erkennen.
• Für das Western Blotting wird eine Bande bei ca. 24 kDa erwartet. Da RAB11B einer Prenylierung und anderen Modifikationen unterliegt, können in einigen Proben geringfügige Größenverschiebungen oder zusätzliche Bänder beobachtet werden; validieren Sie mit positiven Kontrollen wie HeLa- oder HEK293-Zelllysaten.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie ist eine Permeabilisierung typischerweise für intrazelluläre Ziele erforderlich. Es sollten endosomale und vesikuläre Färbungsmuster erwartet werden, möglicherweise mit einer Anreicherung an Recycling-Endosomen.
• Für ELISA-Anwendungen kann das Peptidimmunogen als Beschichtungsantigen dienen, jedoch wird eine sorgfältige Optimierung der Antikörperverdünnung und der Blockierungsbedingungen empfohlen.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz unter Verwendung einer standardisierten Positivkontrolle überprüft werden. Erwägen Sie eine Validierung im entsprechenden Probenystem (Mensch, Maus oder Ratte), um die Leistung zu bestätigen.

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