Anti-QPCT-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q16769

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: QPCT-Funktion und -Lokalisierung

• Proteinidentität: QPCT (Glutaminyl-Peptid-Cyclotransferase), auch bekannt als Glutaminyl-Cyclase (QC, sQC) und Glutamyl-Cyclase, ist ein sekretiertes Transferase-Enzym, das durch das QPCT-Gen kodiert wird. Es gehört zur Acyltransferase-Familie und enthält eine zinkbindende aktive Stelle.
• Kernfunktion des Enzyms: Katalysiert die Bildung von N-terminalen Pyroglutamyl-Resten aus Glutaminyl- oder Glutamyl-Vorstufen, eine kritische Modifikation für die Bioaktivität und Stabilität vieler Peptide und Proteine.
• Substratspezifität: Zeigt eine Verzerrung gegen saure und Tryptophan-Reste, die direkt neben dem N-terminalen Glutaminyl liegen, zeigt aber wenig Abhängigkeit von der Peptidkettenlänge über die zweite Position hinaus.
• Amyloid-Beta-Verarbeitung: Konvertiert in vitro N-terminal verkürzte Amyloid-Beta-Peptide (z. B. [Glu-3]-Amyloid-Beta) in pyroglutamat-modifizierte Formen, die stärker zur Aggregation neigen und neurotoxisch sind.
• Krankheitsrelevanz: Beteiligt an der Alzheimer-Krankheit durch die Bildung von Pyroglutamat-Amyloid-Beta-Peptiden, die in senilen Plaques gefunden werden; kann auch an anderen amyloidbedingten Pathologien beteiligt sein.
• Subzelluläre Lokalisierung: In den extrazellulären Raum sezerniert, konsistent mit seiner Rolle bei der Modifikation extrazellulärer Substrate wie Hormone, Chemokine und Amyloid-Peptide.
• Strukturelle Merkmale: Enthält Disulfidbrücken, N-verknüpfte Glykosylierungsstellen und ein Signalpeptid; das reife Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 40,9 kDa (beobachtet um 41 kDa).
• Alternatives Spleißen: Das QPCT-Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, das mehrere Isoformen produziert; das Immunogen (Volllänge, aa 1-361) zielt auf alle bekannten Isoformen ab, die diese Region enthalten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem全长 humanen QPCT-Protein (aa 1-361), was eine breite Epitop-Abdeckung bieten sollte und sowohl Vorstufen- als auch Reifformen erkennen kann. Die polyklonale Natur kann die Detektionsempfindlichkeit über Spleißvarianten hinweg verbessern.
• Für den Western Blot wird unter reduzierenden Bedingungen ein spezifisches Band in der Nähe von 41 kDa erwartet. Da QPCT sezerniert wird, kann es je nach experimentellem Kontext vorzuziehen sein, Serum, Plasma oder Zellkulturüberstände anstelle von Ganzzell-Lysaten zu analysieren.
• Für IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle optimiert werden, um QPCT in Kompartimenten des sekretorischen Weges zu visualisieren; die extrazelluläre Färbung erfordert möglicherweise nicht-permeabilisierende Bedingungen. Eine Kollokalisierung mit Golgi- oder Vesikelmarkern kann bewertet werden.
• Für ELISA sollte die Verwendung des Antikörpers in einem Sandwich-Format mit einem unterschiedlichen Capture-Antikörper in Betracht gezogen werden; dieser Antikörper kann als Nachweisreagenz dienen. QPCT liegt in löslicher Form in biologischen Flüssigkeiten vor, was es für quantitative Assays geeignet macht.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-QPCT ermöglicht die Bewertung in Nagetiermodellen der Neurodegeneration. Da die Identität der Aminosäuresequenz jedoch nicht zu 100 % gegeben ist, sollte die Empfindlichkeit in der entsprechenden Spezies und im entsprechenden Gewebesystem validiert werden.

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