Anti-Pyruvat-Carboxylase (PC) Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - P11498

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Pyruvat-Carboxylase (PC)

• Pyruvat-Carboxylase (PC) ist ein mitochondriales Enzym, das die ATP-abhängige Carboxylierung von Pyruvat zu Oxalacetat katalysiert, eine kritische anaplerotische Reaktion, die die Zwischenprodukte des Tricarbonsäurezyklus auffüllt.
• Die Reaktion erfolgt in zwei Schritten: Die Biotin-Prosthetische Gruppe wird zunächst unter Verwendung von Bicarbonat und ATP carboxyliert, gefolgt von der Übertragung der Carboxylgruppe auf Pyruvat zur Bildung von Oxalacetat.
• PC spielt eine gewebespezifische Rolle bei der Gluconeogenese in Leber und Niere sowie bei der de novo Lipogenese im Fettgewebe, in der Leber und im Gehirn und verbindet so Kohlenhydrat- und Lipidstoffwechsel.
• PC befindet sich in der mitochondrialen Matrix und wird als Vorläufer mit einem Transitpeptid synthetisiert, das es zu den Mitochondrien dirigiert.
• PC ist eine Biotin-abhängige, multifunktionale Ligase, die Mangan oder Magnesium als Metall-Cofaktor benötigt und durch Acetylierung und Phosphorylierung reguliert wird.
• Mutationen im PC-Gen sind mit einem Pyruvat-Carboxylase-Mangel assoziiert, einer seltenen autosomal-rezessiven Stoffwechselstörung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 879–1178 der humanen PC und zielt auf die C-terminale Region ab; erwägen Sie, die Reaktivität mit endogener PC in der relevanten Spezies und dem relevanten Gewebe zu bewerten.
• Für Western Blotting wird ein Band nahe 130 kDa erwartet; fügen Sie geeignete Molekulargewichtsmarker ein und validieren Sie mit positiven Kontrollen.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung (WB, IF/ICC, IP, ELISA) mithilfe einer Titrationsreihe und geeigneter Blockierbedingungen.
• Für humane, Maus- und Ratten-PC wird Kreuzreaktivität berichtet; aufgrund der polyklonalen Natur sollte die Chargen-zu-Charge-Konsistenz im vorgesehenen Assay überprüft werden.

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