Anti-Pyruvat-Carboxylase (PC)-Kaninchen-mAb für WB und ELISA – P11498

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Pyruvat-Carboxylase

• Die Pyruvat-Carboxylase (PC) ist ein mitochondriales Enzym, das die ATP-abhängige Carboxylierung von Pyruvat zu Oxalacetat katalysiert und eine Schlüsselrolle bei der Glukoneogenese und der Lipidbiosynthese spielt.
• Das Enzym durchläuft eine zweistufige Reaktion: zunächst die Carboxylierung von Biotin durch ATP-Hydrolyse, anschließend die Übertragung der Carboxylgruppe auf Pyruvat.
• Gewebespezifische Expression: In Leber und Niere initiiert PC die Glukosesynthese; in Fettgewebe, Leber und Gehirn trägt sie zur Lipidsynthese bei.
• Das humane Protein wird vom PC-Gen kodiert, ist eine biotinabhängige Carboxylase und gehört zur Familie der multifunktionalen Enzyme.
• PC befindet sich in der mitochondrialen Matrix und enthält ein Transitpeptid für den Import in die Mitochondrien.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung und Phosphorylierung; außerdem ist das Protein mit krankheitsassoziierten Varianten verbunden.
• Es enthält Bindungsstellen für ATP, Biotin und Mangan, die für seine katalytische Aktivität essenziell sind.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1–100) der humanen PC; diese Region ist bei Maus und Ratte konserviert, was mit der beobachteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 130 kDa erwartet; aufgrund des hohen Molekulargewichts sollte ein reduzierendes Gel und geeignete Beladungskontrollen verwendet werden.
• Im ELISA kann der Antikörper sowohl für direkte als auch für Capture-Detektionsformate verwendet werden; validieren Sie ihn mit rekombinanter PC oder Gewebelysaten, in denen PC stark exprimiert wird (z. B. aus Leber oder Niere).
• Da PC ein mitochondriales Protein ist, kann die Probenvorbereitung für eine optimale Detektion Protokolle zur Anreicherung von Mitochondrien erfordern.
• Aufgrund des im Zielprotein vorhandenen Biotins sollten bei der Verwendung biotinbasierter Detektionssysteme biotinhaltige Blockierungsreagenzien vermieden werden, um den Hintergrund zu reduzieren.

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