Anti-PYM1 Kaninchen polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q9BRP8

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PYM1 Funktion und Lokalisation

• PYM1, auch bekannt als Partner von Y14 und mago, ist ein wichtiger Regulator des Exon-Junctions-Komplexes (EJC) und fungiert als EJC-Demontagefaktor, der die translationsabhängige Entfernung des EJC aus gespleißten mRNAs fördert.
• Es assoziiert mit der 40S-Ribosomenuntereinheit, was wahrscheinlich seine EJC-Demontageaktivität auf mRNAs beschränkt, die aktiv transliert werden, und eine vorzeitige Disruption des Komplexes verhindert.
• PYM1 interferiert mit der nonsense-vermittelten mRNA-Decay (NMD) und verstärkt die Translation von gespleißten mRNAs, wodurch es die EJC-Funktionen nach dem Spleißen antagonistisiert.
• Obwohl PYM1 an RNA binden kann, ist die funktionelle Relevanz dieser Interaktion unklar; RNA-Bindung wurde in einigen Studien beobachtet (PubMed:14968132), aber in anderen nicht unabhängig vom EJC (PubMed:19410547). Verwandte Referenzen: PMID:14968132, PMID:19410547
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, insbesondere im Nukleolus und im Nukleoplasma, was mit seiner Shuttle-Funktion bei der mRNA-Prozessierung übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität oder Interaktionen regulieren können.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, was dem PYM1-Genprodukt funktionelle Vielfalt verleiht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1-204) von menschlichem PYM1, was darauf hindeutet, dass der Antikörper Epitope innerhalb dieser konservierten Domäne erkennen kann; berücksichtigen Sie die Sequenzalignment mit Maus- und Ratten-Orthologen, um die beobachtete Kreuzreaktivität zu bestätigen.
• Für das Western Blotting hat PYM1 ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~23 kDa; validieren Sie die beobachtete Bandengröße im relevanten ProbenSystem und verwenden Sie geeignete Beladungskontrollen.
• Für Immunfluoreszenz/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen optimiert werden, da PYM1 sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Lokalisation aufweist; fügen Sie Organellenmarker hinzu, um die Spezifität zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können für die qualitative oder semiquantitative Detektion verwendet werden; erwägen Sie gepaarte Antikörperstrategien für Sandwich-Immunoassays, wenn quantitative Daten benötigt werden.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörperpool handelt, sollte die Charge-zu-Charge-Konsistenz bei dem Wechsel zwischen Produktionschargen überprüft werden, und die Arbeitsverdünnungen sollten empirisch für jeden Assay bestimmt werden.

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