Anti-PYCRL-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q53H96

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PYCRL-Funktion und -Lokalisierung

• PYCRL (Pyrrolin-5-carboxylat-Reduktase 3), auch bekannt als PYCR3, ist ein Enzym, das den letzten Schritt der Prolinbiosynthese katalysiert und für die Umwandlung von Pyrrolin-5-carboxylat (P5C) in L-Prolin unter Verwendung von NAD(P)H als Kofaktor verantwortlich ist. Diese Reaktion ist spezifisch mit dem aus Ornithin abgeleiteten Prolinweg verknüpft. Verwandte Referenzen: PMID:23024808 PMID:36414121
• Das Protein ist vorwiegend im Zytoplasma lokalisiert, wo es auf zytoplasmatisches P5C einwirkt, das aus dem Ornithin-Katabolismus stammt.
• PYCRL ist ein Mitglied der Pyrrolin-5-carboxylat-Reduktase-Familie, zusammen mit PYCR1 und PYCR2; jedoch ist PYCRL einzigartig dem Ornithin-zu-Prolin-Weg gewidmet, während die anderen Isoformen primär bei der aus Glutamat abgeleiteten Prolinsynthese funktionieren.
• Alternatives Spleißen des PYCR3-Gens erzeugt mehrere Transkriptvarianten, die zu Proteinisoformen mit veränderten Funktionen oder regulatorischen Eigenschaften führen können.
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung wurden berichtet, die möglicherweise die enzymatische Aktivität oder Stabilität modulieren.
• Das berechnete Molekulargewicht des PYCRL-Proteins beträgt ca. 28,7 kDa, was mit der beobachteten Bande bei 29 kDa in Western-Blot-Experimenten übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western-Blot-(WB)-Assays bereiten Sie Ganzzell-Lysate aus humanen oder murinen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie PYCRL exprimieren; eine einzelne Bande nahe 29 kDa wird erwartet. Aufgrund der polyklonalen Natur können mehrere Banden auftreten, wenn kreuzreaktive Epitope vorhanden sind; erwägen Sie die Verwendung einer Peptidblockierung, um die Spezifität zu bestätigen.
• In ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper für direkte oder Sandwich-ELISA verwendet werden, um PYCRL in biologischen Proben zu quantifizieren; titrieren Sie den Antikörper, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem PYCRL wurde nachgewiesen; für andere Spezies kann eine Sequenzhomologie-Analyse die potenzielle Reaktivität leiten, aber eine empirische Validierung ist unerlässlich.
• Da das Immunogen die Reste 13–286 umfasst, erkennt der Antikörper wahrscheinlich mehrere lineare und konformationelle Epitope; denaturierende und reduzierende Bedingungen im WB sind im Allgemeinen kompatibel.
• Bei der Untersuchung des Prolinstoffwechsels kombinieren Sie diesen Antikörper mit Inhibitoren der Ornithin-Aminotransferase, um die PYCRL-Substratspiegel zu modulieren und den Wegfluss zu bewerten.
• Fügen Sie immer geeignete Kontrollen wie PYCRL-Knockout-Zelllinien oder siRNA-behandelte Proben hinzu, um die Bandenidentität zu bestätigen.

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