Anti-PXDN-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB und ELISA – Q92626

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Peroxidasin-Homologs (PXDN)

• Das Peroxidasin-Homolog (PXDN) ist eine sezernierte, hämhaltige Peroxidase aus der Peroxidase-Familie, die auch als Melanom-assoziiertes Antigen MG50, vaskuläre Peroxidase 1 und p53-responsives Gen-2-Protein bekannt ist.
• PXDN katalysiert die Zwei-Elektronen-Oxidation von Bromid durch Wasserstoffperoxid unter Bildung von Hypobromit. Dieses vermittelt die Bildung von Sulfilimin-Quervernetzungen zwischen Methionin- und Hydroxylysinresten in NC1-Hexameren von Kollagen IV, die für den Aufbau des Kollagen-IV-Netzwerks essenziell sind. Zugehörige Referenzen: PMID:18929642, PMID:19590037, PMID:22842973
• Diese Sulfilimin-Quervernetzungen sind entscheidend für den Kollagen-IV-abhängigen Aufbau von Fibronektin und Laminin sowie für die vollständige Signalübertragung durch die extrazelluläre Matrix (ECM), einschließlich der durch Wachstumsfaktoren induzierten Zellproliferation und des Überlebens von Endothelzellen, und tragen dadurch zur Integrität der Basalmembran bei. Zugehörige Referenzen: PMID:19590037, PMID:32543734, PMID:34679700
• PXDN kann außerdem über die ERK1/2-, Akt- und FAK-Signalwege die Tubulogenese und Angiogenese fördern. Zugehörige Referenz: PMID:25713063
• Zusätzlich bromiert PXDN die Alpha-2-Kette von Kollagen IV an Tyr-1485, was zu einer Bromanreicherung in den Basalmembranen führt. In vitro kann es Thiocyanat und Iodid oxidieren, die mit Bromid konkurrieren und die Bildung von Sulfiliminbindungen hemmen können. Zugehörige Referenzen: PMID:32571911, PMID:28154175
• PXDN wird in mehreren Geweben exprimiert, mit höheren Konzentrationen in Herz, Lunge, Eierstock, Milz, Darm und Plazenta sowie niedrigeren Konzentrationen in Leber, Kolon, Bauchspeicheldrüse, Niere, Thymus, Skelettmuskel und Prostata. Es wird außerdem in verschiedenen Tumoren exprimiert, darunter Melanom, Brustkrebs, Eierstockkrebs und Glioblastom.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich PXDN im endoplasmatischen Retikulum und wird in den extrazellulären Raum sezerniert, wo es in die extrazelluläre Matrix und die Basalmembran eingebaut wird.
• Das Protein enthält Leucin-reiche Wiederholungen, Immunglobulindomänen und eine Peroxidasedomäne; es bindet Häm, Kalzium und Laminine. Krankheitsassoziierte Varianten und alternatives Spleißen bringen PXDN mit Entwicklungs- und Krankheitsprozessen in Verbindung. Zugehörige Referenz: PMID:32485152

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1320–1479 nahe dem C-Terminus des humanen PXDN; diese Region kann den Nachweis des vollständigen Proteins und einiger prozessierter Formen ermöglichen. Es sollte überprüft werden, ob die gewünschte Isoform in den relevanten Probenmaterialien nachgewiesen wird.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 165 kDa; die Verwendung eines Acrylamidgels mit niedrigem prozentualem Anteil und verlängerte Transferzeiten können die Auflösung und Transfereffizienz bei Proteinen mit hohem Molekulargewicht verbessern.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit murinem PXDN, wodurch möglicherweise Untersuchungen in Mausmodellen ermöglicht werden. Die Reaktivität sollte jedoch im jeweiligen Versuchsaufbau bestätigt werden.
• Für ELISA sollte der Antikörper gegen das Immunogen oder das native Protein titriert werden, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen; bei polyklonalen Antikörpern kann eine Optimierung der Blockierung erforderlich sein, um den Hintergrund zu minimieren.

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