Anti-Pumilio 1 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – Q14671

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Pumilio 1

• Sequenzspezifisches RNA-bindendes Protein, das das Pumilio-Antwortelement (PRE) 5'-UGUANAUA-3' in der 3'-UTR von Ziel-mRNAs erkennt. Verwandte Referenzen: PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425
• Wirkt als posttranskriptioneller Repressor über zwei Hauptmechanismen: direkte Rekrutierung des CCR4-POP2-NOT-Deadenylase-Komplexes für den mRNA-Abbau und Erleichterung der Bindung von miRNAs an Zielstellen (z. B. Förderung des Zugangs von miR-221/222 zur CDKN1B/p27-mRNA nach Phosphorylierung). Verwandte Referenzen: PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814
• Reprimiert wichtige Ziel-mRNAs wie E2F3 (beteiligt an der genomischen Stabilität) und ATXN1 (verbunden mit neuronaler Funktion). Verwandte Referenzen: E2F3: PMID:22345517, PMID:29474920; ATXN1: PMID:25768905
• Die Aktivität wird negativ reguliert durch die lange nichtkodierende RNA NORAD, die PUM1 im Zytoplasma sequestriert, um die Repression von mitotischen, DNA-Reparatur- und Replikationsfaktoren zu verhindern. Verwandte Referenzen: PMID:26724866
• Lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, einschließlich P-Körpern und zytoplasmatischen Granula.
• Wird exprimiert in Gehirn, Herz, Niere, Muskel, Darm, Magen und allen fetalen Geweben, aber nicht in Kleinhirn, Corpus callosum, Nucleus caudatus, Hippocampus, Medulla oblongata oder Putamen.
• Zusätzliche Funktionen: Zytoplasmatische Erkennung von viralen Infektionen und Regulation der miRNA MIR199A-Biogenese (in Zusammenarbeit mit PUM2). Verwandte Referenzen: PMID:25340845, PMID:28431233

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 126 kDa; verwenden Sie gegebenenfalls ein Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und verlängerte Transferzeiten, um eine effiziente Detektion zu gewährleisten.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC kann eine geeignete Fixierung (z. B. Paraformaldehyd) und Permeabilisierung (z. B. Triton X-100) erforderlich sein; validieren Sie die subzelluläre Lokalisation in Ihrem spezifischen Zellmodell.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 104–203; diese Region ist zwischen Mensch und Maus konserviert, was mit der angegebenen Kreuzreaktivität übereinstimmt; überprüfen Sie bei Bedarf die Reaktivität bei anderen Arten.
• Für ELISA-Anwendungen bestimmen Sie die optimale Antikörperverdünnung mittels Checkerboard-Titration; schließen Sie geeignete Positiv- und Negativkontrollen ein.

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