Anti-PUF60 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q9UHX1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PUF60-Funktion und Lokalisierung

• PUF60 (Poly(U)-bindender Spleißfaktor 60 kDa), auch bekannt als FIR, RoBPI oder Siah-BP1, ist ein DNA- und RNA-bindendes Protein, das am prä-mRNA-Spleißen, Apoptose und Transkriptionsregulation beteiligt ist.
• Es fungiert als transkriptioneller Repressor über den Core-TFIIH-Komplex, verringert die ERCC3-Helikaseaktivität und reprimiert die FUBP1-induzierte MYC-Transkription am P2-Promotor.
• Beim prä-mRNA-Spleißen fördert PUF60 das Spleißen von Introns mit schwachen 3'-Spleißstellen und bindet kooperativ mit U2AF2 an die Pyrimidin-Trakt- und 3'-Spleißstellenregionen.
• Isoform 6, die in kolorektalem Karzinom exprimiert wird, aber nicht im normalen Epithel, kann die MYC-Transkription nicht reprimieren und hemmt die FIR-induzierte Apoptose, was möglicherweise zum Tumorwachstum beiträgt.
• PUF60 ist im Zellkern lokalisiert und wird in vielen Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Gehirn, Lunge, Leber, Niere und Kolon.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung und Phosphorylierung und ist ein bekanntes Ziel für Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinanter Fragment, das die Aminosäuren 243–542 von humanem PUF60 (NP_055096.2) abdeckt, das in der C-terminalen Region liegt, die RNA-Erkennungsmotive enthält; dieses Design kann die Spezifität erhöhen.
• Für den Western Blot sollte eine Standard-Transferpuffer verwendet und die Verdünnung des Primärantikörpers basierend auf dem endogenen Expressionsniveau in Ihrer Probe über einen Bereich (z.B. 1:500–1:2000) optimiert werden.
• Bei der Immunpräzipitation kann der Antikörper endogenes PUF60 aus humanen, Maus1- oder Rattenzelllysaten einfangen; validieren Sie dies durch Co-Immunoblotting mit einem Anti-PUF60-Antikörper von einem anderen Wirt.
• Für ELISA kann die polyklonale Natur eine robuste Signalverstärkung bieten; kombinieren Sie ihn für Sandwich-Anwendungen mit einem passenden monoklonalen Detektionsantikörper.
• Fügen Sie immer geeignete positive und negative Kontrollen (z.B. HeLa-Ganzzelllysat für WB) hinzu, um die Antikörperleistung zu bestätigen.

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