Anti-PU.1/SPI1 monoklonaler Antikörper für WB, IF, IHC-P, FC, ELISA - P17947

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PU.1/SPI1-Funktion und Lokalisierung

• PU.1 (SPI1) ist ein Pionier-Transkriptionsfaktor, der Heterochromatin in hämatopoetischen Stammzellen dekomprimiert und so anderen Transkriptionsfaktoren Zugang zu ansonsten unzugänglichen genomischen Stellen ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:23658224 PMID:33951726
• Es bindet direkt über seine ETS-Domäne an purinreiche DNA-Kernsequenzen (PU-Box, 5'-GAGGAA-') und reguliert so die Genexpression, die für die Entwicklung der myeloischen und lymphatischen Linie entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:33951726
• PU.1 aktiviert Gene wie CSF1R transkriptionell und kooperiert mit anderen Transkriptionsfaktoren (z.B. GATA1 für die FCER1A-Transaktivierung) auf Promotoren mit niedrigaffinen Bindungsstellen.
• Es spielt eine entscheidende Rolle bei der B-Zell-Entwicklung, insbesondere für den Übergang von der Pro- zur Prä-B-Zelle, und wird in Keimzentrums-B-Zellen exprimiert. Verwandte Referenzen: PMID:33951726 PMID:23166356
• Subzellulär lokalisiert PU.1 im Zellkern, was mit seiner Funktion als Transkriptionsfaktor übereinstimmt.
• PU.1 ist ein Phosphoprotein und unterliegt alternativem Spleißen, wodurch Isoformen mit potenziell unterschiedlichen regulatorischen Rollen entstehen.
• In vitro kann PU.1 an RNA binden und das prä-mRNA-Spleißen beeinträchtigen, was auf zusätzliche posttranskriptionelle regulatorische Funktionen hindeutet.
• Genetische Varianten von SPI1 sind mit Entwicklungsstörungen assoziiert, und es wird als Proto-Onkogen klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für den Western Blot ist ein Band bei etwa 31 kDa zu erwarten; optimieren Sie die Blockierbedingungen und die Primärantikörperverdünnung für Ihren spezifischen Zell- oder Gewebelysat.
• Stellen Sie bei Immunfluoreszenz und Immunhistochemie eine ausreichende Permeabilisierung für den Nachweis der Kernlokalisation sicher; erwägen Sie die Verwendung einer Kern-Gegenfärbung.
• Das Immunogenpeptid kartiert auf die N-terminale Region (Aminosäuren 1-100); der Antikörper kann sowohl vollständiges PU.1 als auch bestimmte Spleißvarianten, die dieses Epitop enthalten, erkennen.
• Für die Durchflusszytometrie (intrazelluläre Färbung) validieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle in Ihrem relevanten hämatopoetischen Zellsystem.
• Kreuzreaktivität wird für den Menschen angegeben; bei Anwendung auf andere Spezies führen Sie eine Sequenzalignment- und Pilotprüfung durch.

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