Anti-PTEN Kaninchen-monoklonaler Antikörper für Western Blot – P60484

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PTEN

• PTEN (Phosphatase und Tensin-Homolog) ist eine dualspezifische Proteinphosphatase, die tyrosin-, serin- und threonin-phosphorylierte Proteine dephosphoryliert. Verwandte Referenzen: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• Es wirkt außerdem als Lipidphosphatase mit einer Präferenz für Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PIP3), wobei es das D3-Phosphat entfernt, um PIP2 zu erzeugen. Verwandte Referenzen: PMID:16824732 PMID:26504226 PMID:9593664
• Zentraler negativer Regulator des PI3K-AKT/PKB-Signalwegs; durch Dephosphorylierung von PIP3 dämpft es die AKT-Aktivierung und moduliert dadurch den Zellzyklusverlauf und das Zellüberleben. Verwandte Referenzen: PMID:31492966 PMID:37279284
• Nicht-phosphoryliertes PTEN kooperiert mit MAGI2 zur Unterdrückung der AKT1-Aktivierung; die Phosphorylierung von PTEN ändert seine Bindungspräferenz von p85 zu DLC1, wodurch die RHOA-gesteuerte Regulation der Zellmigration und Polarität ermöglicht wird. Verwandte Referenzen: PMID:11707428 PMID:26166433
• Dephosphoryliert die Fokalkontakt-Kinase (FAK) und hemmt die Zellmigration, die Integrin-vermittelte Zellausbreitung und die Bildung von Fokalkontakten. Verwandte Referenzen: PMID:22279049
• Beteiligt an Neurogenese und synaptischer Plastizität; es wird nach Aktivierung des NMDA-Rezeptors in die postsynaptische Dichte rekrutiert, um die Langzeitdepression (LTD) zu modulieren, und steuert die Integration neu geborener Neuronen über den AKT-mTOR-Signalweg.
• Lokalisiert überwiegend im Zytoplasma und Zellkern, zusätzlich kommt es in PML-Körpern, dendritischen Stacheln und der postsynaptischen Dichte vor; es kann auch sezerniert werden. Wird ubiquität in adulten Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Muskel, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• Es ist als Tumorsuppressor anerkannt; die nukleare monoubiquitinierte Form weist ein größeres Apoptosepotenzial auf als die zytoplasmatische nicht-ubiquitinierte Form. Verwandte Referenzen: PMID:10468583 PMID:18716620

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Reste 304–403) von humanem PTEN; die Konservierung bei Maus und Ratte macht es wahrscheinlich geeignet für den Nachweis mehrerer Spezies in Western Blot- und IHC-Anwendungen.
• Im Western Blot (WB) kann PTEN aufgrund von Isoformen und posttranslationalen Modifikationen mehrere Banden (~20 kDa, 47 kDa und 65 kDa) erzeugen; erwägen Sie die Zugabe von Phosphataseinhibitoren zum Lysepuffer, um die Phosphorylierungszustände zu erhalten.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen (z. B. Citratpuffer pH 6,0 oder EDTA pH 8,0) empirisch optimiert und die Kreuzreaktivität mit Nagetiergeweben an relevanten Kontrollen validiert werden.
• Bei der Immunpräzipitation (IP) ermöglicht der Ursprung aus Kaninchen-IgG die Kompatibilität mit Standard-Protein-A/G-Perlen; bestätigen Sie die IgG-Unterklasse für eine optimale Auswahl der Perlen.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie (IF/ICC) kann eine Permeabilisierung mit 0,1–0,5 % Triton X-100 und eine Blockierung mit 5 % BSA helfen, unspezifischen Hintergrund zu reduzieren.

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