Anti-PTEN monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA – P60484

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PTEN

• PTEN (Phosphatase und Tensin-Homolog) ist eine dualspezifische Proteinphosphatase und Lipidphosphatase, die als entscheidender Tumorsuppressor wirkt. Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1-403 der kanonischen Isoform (UniProt P60484).
• Als Lipidphosphatase dephosphoryliert PTEN Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphat (PtdIns(3,4,5)P3), um den PI3K-AKT/PKB-Signalweg zu antagonisieren und moduliert dadurch Zellzyklusprogression, Überleben und Stoffwechsel. Verwandte Referenzen: PMID:31492966 PMID:37279284
• Es fungiert auch als Proteinphosphatase, die tyrosin-, serin- und threonin-phosphorylierte Proteine dephosphoryliert und beeinflusst dadurch vielfältige Signalkaskaden. Verwandte Referenzen: PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• PTEN lokalisiert in mehreren subzellulären Kompartimenten, darunter Zytoplasma, Zellkern, PML-Körperchen, dendritische Stacheln, postsynaptische Dichte und kann sezerniert werden – dies spiegelt seine vielfältigen Funktionen wider.
• Es wird in relativ hohen Mengen in allen adulten Geweben exprimiert, einschließlich Herz, Gehirn, Plazenta, Lunge, Leber, Muskel, Niere und Bauchspeicheldrüse.
• PTEN spielt eine Schlüsselrolle bei der Zellmigration durch Dephosphorylierung der Fokaladhäsionskinase und Interaktion mit DLC1/TNS3-Komplexen zur Regulation der RHOA- und RAC1-Aktivierung an der Vorderkante und im hinteren Bereich wandernder Zellen. Verwandte Referenzen: PMID:22279049 PMID:26166433
• Posttranslationale Modifikationen wie Monoubiquitinierung beeinflussen die subzelluläre Lokalisation und die apoptotische Funktion von PTEN; kerniges monoubiquitiniertes PTEN weist ein größeres apoptotisches Potenzial auf. Verwandte Referenzen: PMID:10468583 PMID:18716620

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das nahezu vollständige humane PTEN (AS 1-403), daher wird erwartet, dass der Antikörper Gesamt-PTEN unabhängig vom Phosphorylierungsstatus erkennt. Für Western Blot sollten Sie in Betracht ziehen, Phosphataseinhibitoren in Ihrem Lysepuffer hinzuzufügen, um die endogenen PTEN-Phosphorylierungsmuster zu erhalten.
• PTEN wandert bei SDS-PAGE bei etwa 47 kDa; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und führen Sie korrekte Positiv-/Negativkontrollen (z. B. PTEN-Knockout-Zelllysate) durch, um die Bandenidentität zu bestätigen.
• Testen Sie für die Immunpräzipitation verschiedene Antikörper-Lysat-Verhältnisse und Inkubationsbedingungen, um die Capture-Effizienz zu optimieren. Die Leistungsfähigkeit des Antikörpers in IP wurde nachgewiesen; dennoch können individuelle experimentelle Systeme eine Optimierung erfordern.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC weist PTEN sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbung auf. Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden können die Lokalisationsmuster erheblich beeinflussen; validieren Sie die Färbung in Ihrer Zelllinie mit bekannten PTEN-Expressionsprofilen und verwenden Sie Isotypkontrollen.

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