Anti-PTBP2 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF und IHC - Q9UKA9

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PTBP2

• PTBP2 (Polypyrimidintrakt-bindendes Protein 2) ist ein RNA-bindendes Protein, das auch als neuronales PTB (nPTB), PTB-ähnliches Protein (PTBLP) oder brPTB bekannt ist. Es gehört zur hnRNP-Familie und ist das neuronenangereicherte Homolog des ubiquitären PTBP1.
• Es bindet an intronische Polypyrimidintrakte und vermittelt die negative Regulation des Exon-Spleißens. In neuronalen Geweben kann es den Spleißaktivator NOVA1 antagonisieren, um die Auswahl von alternativen Exonen feinabzustimmen.
• Es übernimmt weitere Aufgaben bei der Translationsregulation und verbindet die posttranskriptionelle Kontrolle mit der Genexpressionsergebnis.
• Es lokalisiert überwiegend im Zellkern, was mit seiner primären Rolle bei der Prä-mRNA-Prozessierung übereinstimmt.
• PTBP2 durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität, subzelluläre Dynamik oder Proteininteraktionen modifizieren können.
• Das Protein wird hauptsächlich im Gehirn exprimiert, ist aber auch in Herz und Skelettmusker nachweisbar. Es existieren mehrere Isoformen: Isoformen 1 und 2 sind neuronen-spezifisch, Isoformen 3 und 4 kommen in nicht-neuronalen Geweben vor, und Isoformen 5 und 6 sind verkürzte Formen in nicht-neuronalen Zellen.
• Es weist im Vergleich zu PTBP1 eine geringere intrinsische RNA-Bindungsaffinität auf – eine Eigenschaft, die seine regulatorischen Funktionen in unterschiedlichen zellulären Kontexten beeinflussen kann.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein N-terminales Peptid (Aa 1–100) von menschlichem PTBP2, eine Region, die bei Mensch, Maus und Ratte hochkonserviert ist. Diese Konservierung liegt wahrscheinlich der berichteten Kreuzreaktivität zugrunde.
• Bei der Western Blot-Analyse ist ein vorwiegende Bande nahe 57 kDa zu erwarten, die der volllängen PTBP2 entspricht. Zusätzliche Banden können durch alternative Isoformen oder posttranslationale Modifikationen entstehen; überprüfen Sie die Spezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Bei der Immunpräzipitation empfehlen wir die kovalente Quervernetzung des Antikörpers an Protein A/G-Perlen, um die Koelution von Schwer- und Leichtketten zu minimieren, falls diese die nachgeschaltete Detektion stören.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sollte die nukleare Lokalisation von PTBP2 bestätigt werden. Optimieren Sie die Fixierung (z. B. 4 % PFA für IF, formalinfixierte Paraffineinbettungen für IHC) und Permeabilisierung (z. B. 0,1–0,2 % Triton X-100), um eine ausreichende Epitop-Retrieval und Signal-Klarheit zu erreichen.
• Da die PTBP2-Expression in neuronalen Geweben am höchsten ist, verwenden Sie Gehirngewebe oder neuronale Zelllinien als Positivkontrolle; nicht-neuronale Zellen können niedrigere Spiegel oder unterschiedliche Isoformen exprimieren.
• Bei der Verwendung von ELISA stellen Sie sicher, dass das beschichtete Antigen die native Konformation der N-terminalen Region erhält, um die Antikörperbindung zu erhalten.

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