Anti-PSMB8 Kaninchen-Polyclonalkörper für WB, IF/ICC, ELISA - P28062

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PSMB8

• PSMB8 (Proteasom-Untereinheit Beta Typ-8), auch bekannt als LMP7, PSMB5i und RING10, ist eine katalytische Untereinheit des Immunoproteasoms, einer spezialisierten Form des 26S-Proteasoms.
• Es ersetzt die konstitutive Untereinheit PSMB5 im Immunoproteasom und erhöht die Fähigkeit, Peptide nach hydrophoben und basischen Resten zu spalten, wodurch die Erzeugung von MHC-Klasse-I-bindenden Peptiden für die Antigenpräsentation gefördert wird.
• PSMB8 spielt eine entscheidende Rolle bei der Erzeugung gespleißter antigener Peptide, die durch die Ligierung zweier getrennter Spaltprodukte entstehen – ein Prozess, der für die Erweiterung der Diversität präsentierter Antigene essenziell ist (PubMed:27049119). Zugehörige Referenzen: PMID:27049119
• Das Protein ist an der Apoptose beteiligt, indem es den Abbau des anti-apoptotischen Proteins MCL1 vermittelt, und es ist ein Hauptbestandteil der durch Interferon Gamma induzierten Sensitivität.
• PSMB8 wird außerdem mit entzündlichen Signalwegen in Verbindung gebracht und ist für die Differenzierung von Präadipozyten zu Adipozyten erforderlich, wodurch das Immunoproteasom an die Stoffwechselregulation gekoppelt wird.
• Subzellulär lokalisiert PSMB8 sowohl im Zytoplasma als auch im Zellkern, was mit der Verteilung des Proteasoms übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Phosphorylierung (wie in UniProt-Schlüsselwörtern annotiert), und das Protein unterliegt alternativem Spleißen, wodurch Isoformen mit unterschiedlichen Funktionen entstehen (z. B. Isoformen E1 und E2 in Krebszellen).

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 163-272 von humanem PSMB8 abdeckt, was dem C-terminalen Bereich entspricht. Dieses Design kann die Spezifität für den Nachweis von endogenem PSMB8 über Spezies hinweg erhöhen.
• Für das Western Blotting ist eine Bande bei etwa 30 kDa zu erwarten. Validieren Sie dies durch die Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollen in Ihrem Probensystem.
• Bei Immunfluoreszenz/Immunozytochemie ist eine zytoplasmatische und nukleäre Färbung zu erwarten. Optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für das beste Signal.
• Für ELISA-Anwendungen empfiehlt sich die Kombination dieses polyclonalen Antikörpers mit einem monoklonalen Fangantikörper für die Entwicklung eines Sandwich-ELISA; validieren Sie mit rekombinantem PSMB8 oder Zelllysaten.
• Da die Expression von PSMB8 durch Interferon Gamma induziert werden kann, müssen Sie möglicherweise Zellen stimulieren, um bei bestimmten Zelltypen nachweisbare Konzentrationen zu erreichen.

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