Anti-PSMA/FOLH1 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, ELISA - Q04609

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PSMA/FOLH1-Funktion und Lokalisierung

• PSMA/FOLH1, auch bekannt als Glutamat-Carboxypeptidase 2, Folathydrolase 1 und NAALADase I, ist eine multifunktionale Zink-Metalloprotease, die vom FOLH1-Gen kodiert wird. Sie zeigt sowohl Folathydrolase- als auch N-acetylierte-alpha-verknüpfte-saure Dipeptidase (NAALADase)-Aktivität.
• Das Enzym hydrolysiert bevorzugt Tri-alpha-Glutamat-Peptide. Im Darm ist es für die Aufnahme von Nahrungsfolat essentiell; im Gehirn moduliert es die exzitatorische Neurotransmission durch Hydrolyse des Neuropeptids NAAG zur Freisetzung von Glutamat.
• PSMA/FOLH1 besitzt auch eine Dipeptidyl-Peptidase IV-Typ-Aktivität, da es in vitro Gly-Pro-AMC spaltet.
• Das Protein ist ein Single-Pass Typ II-Membranprotein, das hauptsächlich an der Zellmembran lokalisiert ist, aber auch im Zytoplasma vorkommt.
• FOLH1 wird stark im Prostatagewebe exprimiert und in einer Vielzahl von Geweben nachgewiesen, einschließlich Harnblase, Niere, Hoden, Eierstock, Eileiter, Brust, Nebenniere, Leber, Speiseröhre, Magen, Dünndarm, Dickdarm und Gehirn. Es wird auch im Kapillarendothel verschiedener Tumoren exprimiert.
• Bei Prostatakrebs werden unterschiedliche Isoformen exprimiert: Die Isoform PSMA-1 ist in Primärtumoren am häufigsten, und die Isoform PSMA-9 wird spezifisch bei Prostatakrebs exprimiert, während die Isoform PSMA' im normalen Prostatagewebe vorherrscht.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Glykosylierung und Phosphorylierung und benötigt Zink- und Calciumionen für seine katalytische Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die N-terminale cytoplasmatische Domäne (Aminosäuren 1–106) des humanen PSMA/FOLH1 umfasst. Diese Region ist relativ konserviert; jedoch wird Kreuzreaktivität mit Ratte berichtet, daher wird eine Validierung in der relevanten Spezies empfohlen.
• Für Western Blot wird eine Bande bei etwa 84 kDa erwartet. Aufgrund der Glykoprotein-Natur kann die beobachtete Bande etwas größer oder breiter erscheinen. Die optimale Blockierung und Antikörperverdünnung sollte empirisch bestimmt werden.
• Bei Immunfluoreszenz (IF-P) sollte eine Permeabilisierung in Betracht gezogen werden, um Zugang zum intrazellulären Epitop zu ermöglichen. Eine Co-Färbung mit einem Plasmamembran-Marker kann helfen, die Lokalisierung zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper verwendet werden, um humanes PSMA/FOLH1 in Proben wie Zelllysaten oder Gewebeextrakten zu erfassen oder nachzuweisen, aber die Kompatibilität des Sandwich-Paares muss verifiziert werden.

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