Polyklonaler Anti-PSMA/FOLH1-Antikörper für WB und ELISA – Q04609

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PSMA/FOLH1

• PSMA/FOLH1 (Glutamat-Carboxypeptidase 2) ist ein multifunktionelles Zink-Metalloenzym, das vom FOLH1-Gen kodiert wird und auch als GCPII, NAALADase I oder Folathydrolase 1 bekannt ist. Es existieren mehrere Isoformen, wobei PSMA' in der normalen Prostata vorherrscht und PSMA-1/PSMA-9 mit Prostatatumoren assoziiert sind.
• Besitzt zwei enzymatische Aktivitäten: Folathydrolase (Spaltung von Folylpoly-γ-glutamat) und NAALADase (Hydrolyse von N-Acetylaspartylglutamat, NAAG). Im Darm erleichtert es die Aufnahme von Nahrungsfolat; im Gehirn reguliert es die glutamaterge Neurotransmission, indem es NAAG abbaut und dadurch Glutamat freisetzt.
• Spielt eine gut dokumentierte Rolle bei der Progression von Prostatatumoren; es wird konstant stark im Prostataepithel exprimiert und ist bei primären sowie metastasierten Prostatakarzinomen deutlich hochreguliert.
• Die subzelluläre Lokalisierung befindet sich hauptsächlich an der Zellmembran, wo das Protein als Typ-II-Transmembran-Glykoprotein mit einem zytoplasmatischen Schwanz vorliegt; es kann jedoch auch im Zytoplasma nachgewiesen werden.
• Die Gewebeverteilung ist breit: starke Expression in Prostata, Gehirn (ventrales Striatum, Hirnstamm), Niere, Leber und Dünndarm (Bürstensaum des Jejunums). Geringere Konzentrationen finden sich in Harnblase, Hoden, Eierstöcken und anderen Organen. Die Expression der Isoformen variiert zwischen gesundem und malignem Gewebe.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung und Phosphorylierung; das Enzym benötigt zwei Zinkionen und Calcium für die katalytische Aktivität und strukturelle Stabilität.
• In vitro zeigt es zusätzlich eine Dipeptidylpeptidase-IV-ähnliche Aktivität und spaltet Substrate wie Gly-Pro-AMC, was auf eine vielseitige Hydrolyse von Peptidbindungen hindeutet.
• UniProt klassifiziert es als multifunktionelles Enzym, Metalloprotease und Carboxypeptidase; durch alternatives Spleißen entstehen funktionell unterschiedliche Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid innerhalb der Aminosäuren 50–150 der extrazellulären Domäne von humanem PSMA/FOLH1. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot wird eine Bande nahe 84 kDa in humanen Prostatakrebs-Zelllinien (z. B. LNCaP, PC-3) oder in Homogenaten von Prostatagewebe erwartet. Überprüfen Sie die Spezifität durch geeignete Kontrollen und ziehen Sie bei der Verwendung von paraffineingebetteten Schnitten in der IHC eine Antigen-Retrieval-Behandlung in Betracht (hier nicht validiert).
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Fang- oder Detektionsreagenz dienen. Die Kombination mit einem monoklonalen Antikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop kann die Sensitivität in Sandwich-Assays verbessern. Die Kreuzreaktivität mit Nagetierproben sollte empirisch untersucht werden.
• Da polyklonale Antikörper mehrere Epitope erkennen, sollte die Chargenkonsistenz bei quantitativen Assays überwacht werden. Vor groß angelegten Studien werden Pilotversuche mit einem Referenzstandard empfohlen.

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