Anti-PSA/KLK3-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P07288

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PSA/KLK3

• Das prostataspezifische Antigen (PSA), auch als Gamma-Seminoprotein, Kallikrein-3 (KLK3), P-30-Antigen oder Semenogelase bezeichnet, ist ein Mitglied der Familie der Gewebekallikreine von Serinproteasen, die durch das KLK3-Gen (GeneID 354) kodiert werden.
• Das Protein wird als Präproenzym synthetisiert, zu einem Zymogen verarbeitet und schließlich durch Spaltung aktiviert, wodurch das reife Glykoprotein mit einer Größe von etwa 29 kDa entsteht (UniProt: P07288).
• PSA wird überwiegend in epithelialen Prostatazellen exprimiert und in das Seminalplasma sowie Serum sezerniert; seine Sekretion wird durch das Schlüsselwort „Secreted“ und die Annotation zur subzellulären Lokalisation bestätigt.
• Seine wichtigste physiologische Funktion ist die Hydrolyse von Semenogelin-1, dem wichtigsten gelbildenden Protein im Sperma, wodurch das seminalen Koagulum verflüssigt und die Spermienmotilität erleichtert wird.
• PSA gehört zur erweiterten Kallikrein-Familie, die auf Chromosom 19 gruppiert ist; alternatives Spleißen des KLK3-Gens erzeugt mehrere Isoformen.
• Das Protein wird umfangreich posttranslational modifiziert, einschließlich der Bildung von Disulfidbrücken, Glykosylierung und proteolytischer Verarbeitung aus dem Zymogen; es enthält ein Signalpeptid für die Sekretion.
• Strukturelle Untersuchungen (Schlüsselwort „3D-structure“) haben die katalytische Triade und die Substratbindungstasche aufgeklärt, die für trypsinähnliche Serinproteasen typisch sind.
• PSA wurde durch direkte Proteinsequenzierung und Proteomik identifiziert und dient als Referenzprotein für das menschliche Proteom (Schlüsselwörter: direkte Proteinsequenzierung, Proteomik-Identifizierung, Referenzproteom).

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht einer Sequenz innerhalb des reifen PSA-Proteins (Aminosäuren 162–261) und vermeidet die Signalpeptid- und Propeptidregionen. Diese Region erzeugt wahrscheinlich Antikörper, die sowohl freies PSA als auch an Inhibitoren gebundenes PSA erkennen.
• Für die Western-Blot-Analyse (WB) wird ein reduzierendes SDS-PAGE-Protokoll empfohlen; erwarten Sie eine Bande, die dem reifen Protein bei ungefähr 29 kDa entspricht. Von der Prostata abgeleitete Zelllinien (z. B. LNCaP) oder humanes Seminalplasma können als Positivkontrollen dienen.
• Bei der Entwicklung von ELISA-Tests kann die Kombination dieses monoklonalen Antikörpers mit einem Detektionsantikörper gegen ein nicht überlappendes Epitop die Sensitivität erhöhen. Validieren Sie die Leistung mit rekombinanten PSA-Standards und klinischen Proben, um die Spezifität zu bestätigen.
• Beachten Sie, dass dieser Antikörper für humanes PSA validiert ist; über eine Kreuzreaktivität mit anderen Kallikreinen wurde nicht berichtet.

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