Polyklonaler Anti-PRSS1-Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P07477

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PRSS1

• PRSS1 kodiert die Serinprotease 1, ein Mitglied der Trypsinfamilie der Verdauungsenzyme, auch bekannt als kationisches Trypsinogen, Trypsin-1 oder anionisches Trypsin I.
• Das Protein wird als inaktives Zymogen (Trypsinogen) sezerniert und im Dünndarm durch Enteropeptidase aktiviert, wo es Peptidbindungen an der Carboxylseite basischer Aminosäuren wie Arginin und Lysin spaltet.
• Funktionelle Studien zeigen eine Aktivität gegenüber den synthetischen Substraten Boc-Phe-Ser-Arg-Mec, Boc-Leu-Thr-Arg-Mec, Boc-Gln-Ala-Arg-Mec und Boc-Val-Pro-Arg-Mec, wobei die einkettige Form aktiver ist als die zweikettige Form.
• Es enthält Disulfidbrücken und bindet Calcium, was, wie Strukturstudien zeigen, das Enzym stabilisiert und Autolyse verhindert.
• Die subzelluläre Lokalisation ist überwiegend extrazellulär; das Protein wird in das Darmlumen und den Extrazellularraum sezerniert, um dort seine proteolytische Funktion bei der Verdauung auszuüben.
• Das Protein wird unter Begriffen wie sezerniert, Serinprotease, Zymogen, Disulfidbrücke, Calcium, Metallbindung, Verdauung und Hydrolase klassifiziert.
• PRSS1 unterscheidet sich von anderen Trypsin-Isoformen (z. B. PRSS2 und PRSS3), weist jedoch eine signifikante Sequenzhomologie auf; es wird überwiegend im Pankreas exprimiert und ist Bestandteil des Referenzproteoms.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 24–247 des humanen PRSS1 (Region des reifen Trypsins), daher kann der Antikörper sowohl Proenzym- (Trypsinogen) als auch aktives Trypsin erkennen. Dies sollte bei der Planung von Studien zum Aktivierungszustand berücksichtigt werden.
• Für den Western-Blot (WB) beträgt die vorhergesagte Bandengröße etwa 24 kDa. Es ist jedoch zu beachten, dass posttranslationale Modifikationen (z. B. Sulfatierung) oder die Verarbeitung des Zymogens leichte Verschiebungen verursachen können.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) ist zu beachten, dass PRSS1 im Pankreas in hoher Konzentration vorkommt. Validieren Sie den Antikörper in geeigneten positiven (z. B. Pankreas) und negativen (z. B. nicht sezernierenden Geweben) Kontrollen, um die Spezifität zu beurteilen.
• Eine Kreuzreaktivität wurde für Mensch und Ratte berichtet. Bei Experimenten mit Mäusen oder anderen Arten sollte die Reaktivität aufgrund möglicher Sequenzunterschiede zwischen Trypsin-Isoformen unabhängig überprüft werden.
• Für ELISA-Anwendungen ermöglicht die polyklonale Beschaffenheit des Antikörpers den Nachweis oder die Detektion von PRSS1 in biologischen Flüssigkeiten wie Serum oder Pankreassaft. Dabei sollten jedoch eine Optimierung der Verdünnung und mögliche Interferenzen durch andere Trypsin-ähnliche Proteasen berücksichtigt werden.
• Aufgrund der hohen Sequenzähnlichkeit innerhalb der Trypsinfamilie sollte eine mögliche Kreuzreaktivität mit PRSS2 oder PRSS3 geprüft werden, wenn mit Proben gearbeitet wird, in denen mehrere Isoformen vorkommen können.

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