Anti-PRP19 polyklonaler Antikörper für WB - Q9UMS4

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PRP19

• PRP19 (Pre-mRNA-processing factor 19, auch bekannt als PSO4, SNEV, hPso4, NMP200 und UBOX4) ist eine Ubiquitin-Protein-Ligase und eine essenzielle Komponente des Spleißosoms, die für das Prä-mRNA-Spleißen erforderlich ist. Zugehörige Referenzen: PMID:28076346, PMID:28502770, PMID:29301961
• Als Bestandteil des PRP19C/Prp19-Komplexes vermittelt es die Lys-63-verknüpfte Polyubiquitinierung des U4-Spleißosomproteins PRPF3, wodurch dessen Erkennung durch die U5-Komponente PRPF8 erleichtert und der U4/U5/U6-Tri-snRNP-Komplex stabilisiert wird. Zugehörige Referenzen: PMID:20595234
• PRP19 wird an die C-terminale Domäne der RNA-Polymerase II und an Prä-mRNA rekrutiert und koppelt dadurch die Transkription mit der Spleißmaschinerie. Zugehörige Referenzen: PMID:21536736
• Der XAB2-Komplex, zu dem PRP19 gehört, ist ebenfalls am Prä-mRNA-Spleißen, an der Transkription und an der transkriptionsgekoppelten Reparatur beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:17981804
• Bei der DNA-Schadensantwort wird PRP19 durch den RPA-Komplex an Schadensstellen rekrutiert, wo es RPA1 und RPA2 direkt mit Lys-63-verknüpften Ketten ubiquitiniert und dadurch die Rekrutierung des ATR-ATRIP-Komplexes sowie die Aktivierung von ATR fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:24332808
• Es spielt eine Rolle bei der Reparatur von DNA-Doppelstrangbrüchen, indem es SETMAR an beschädigte DNA rekrutiert, und könnte auch an der Reparatur von DNA-Interstrangvernetzungen beteiligt sein. Zugehörige Referenzen: PMID:18263876, PMID:16223718
• PRP19 kann auch eine Lys-48-verknüpfte Polyubiquitinierung vermitteln, wodurch Substrate für den proteasomalen Abbau markiert werden. Zugehörige Referenzen: PMID:11435423
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Zellkern, das Nukleoplasma, das Zytoplasma, das Zytoskelett (Spindel) und Lipidtröpfchen. Das Protein wird ubiquitär exprimiert, jedoch schwach in seneszenten Zellen und stark in Tumorzelllinien.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer internen Region (Aminosäuren 127-416), wodurch der Nachweis von vollständigem PRP19 und möglicherweise relevanten Isoformen ermöglicht wird.
• Beim Western Blot (WB) wird eine vorherrschende Bande bei etwa 55 kDa erwartet. Validieren Sie das Signal im relevanten Probensystem, da die Expressionsniveaus je nach zellulärer Seneszenz und Tumorstatus variieren.
• Bei Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollten Sie eine Optimierung der Antigenrückgewinnung und geeignete Kontrollen in Betracht ziehen, um die nukleäre und zytosolische Verteilung des Proteins zu berücksichtigen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte macht ihn für vergleichende Studien geeignet. Überprüfen Sie jedoch die Reaktivität in Ihrem experimentellen Modell.
• Aufgrund der Funktionen von PRP19 in Spleißosom- und DNA-Reparaturwegen kann dieser Antikörper zur Untersuchung von Proteininteraktionen und Komplexbildungen mittels Immunpräzipitation (IP) eingesetzt werden.
• Bestimmen Sie für ELISA-Anwendungen die optimale Beschichtungskonzentration empirisch.

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