Anti-Prothrombin (F2), polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB und ELISA - P00734

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Prothrombin (F2)

• Prothrombin (Gerinnungsfaktor II) ist die Zymogen-Vorstufe von Thrombin, einer Serinprotease, die eine zentrale Rolle bei der Blutgerinnung, Hämostase und Wundheilung spielt.
• Thrombin spaltet Peptidbindungen nach Arginin- und Lysinresten und wandelt lösliches Fibrinogen in unlösliches Fibrin um, wodurch Blutgerinnsel gebildet werden.
• Neben Fibrinogen aktiviert Thrombin die Gerinnungsfaktoren V, VII, VIII und XIII und aktiviert, wenn es an Thrombomodulin gebunden ist, Protein C, das antikoagulatorische Wirkungen ausübt.
• Thrombin vermittelt die Aktivierung des Gerinnungsfaktors XI (F11), ein Prozess, der durch negativ geladene Oberflächen verstärkt wird. Verwandte Referenzen: PMID:2019570, PMID:21976677
• Thrombin löst außerdem proinflammatorische Reaktionen in Endothelzellen aus und induziert die Produktion von Zytokinen wie MCP-1/CCL2 und IL8/CXCL8. Verwandte Referenzen: PMID:30568593, PMID:9780208
• Prothrombin wird hauptsächlich in der Leber synthetisiert und in das Plasma sezerniert, was seiner systemischen Funktion bei der Gerinnung entspricht.
• Das Protein enthält mehrere strukturelle Domänen, darunter Kringle-Domänen und eine Gamma-Carboxyglutaminsäure-(GLA)-Domäne, die eine calciumabhängige Membranbindung ermöglicht.
• Posttranslationale Modifikationen wie Gamma-Carboxylierung und die Bildung von Disulfidbrücken sind für seine biologische Aktivität unerlässlich.
• Mutationen im F2-Gen stehen im Zusammenhang mit Thrombophilie und Blutungsstörungen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 364–622 des menschlichen Prothrombins umfasst und auf die Region der schweren Thrombin-Kette abzielt; dieses Design kann den Nachweis sowohl von Prothrombin als auch von aktivierten Thrombinfragmenten ermöglichen.
• Beim Western Blot ist unter reduzierenden Bedingungen eine Hauptbande bei etwa 70 kDa für das vollständige Prothrombin zu erwarten; aufgrund proteolytischer Verarbeitung können zusätzliche Banden mit niedrigerem Molekulargewicht auftreten.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Leistung in Ihrem spezifischen Probensystem (z. B. menschliches Plasma oder rekombinantes Protein) validiert werden, um Spezifität und Chargenkonsistenz zu bestätigen.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz eingesetzt werden; die Kombination mit einem nicht überlappenden monoklonalen Antikörper könnte jedoch die Sensitivität verbessern und den Hintergrund reduzieren.
• Optimale Arbeitsverdünnungen und Inkubationsbedingungen sollten für jede Anwendung empirisch bestimmt werden; veröffentlichte Daten oder Standardprotokolle können als Ausgangspunkt dienen.

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