Produkte Antibodies Polyclonal Antibodies Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Proteinase K - P06873
Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Proteinase K - P06873

Polyclonal Antibodies

Polyklonaler Kaninchen-Antikörper gegen Proteinase K - P06873

Artikelnummer : CM0021463

Preis variiert je nach Spezifikationen und Anpassungen


Anwendung
WB, ELISA
Kreuzreaktivität
Pilze
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Spezifikationen

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Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Parameter Wert
Produktname Proteinase-K-Kaninchen-pAb
Art Mensch
Immunogen Rekombinantes Protein der Proteinase K
Quelle Kaninchen
Kategorie Polyklonale Antikörper
Anwendung WB, ELISA
Kreuzreaktivität Pilze
SWISS P06873
Versand Kühlpack

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Proteinase K

  • Proteinase K ist eine Serinprotease mit breitem Wirkungsspektrum, die ursprünglich aus dem Pilz Parengyodontium album (früher Tritirachium album) isoliert wurde und durch das PROK-Gen kodiert wird.
  • Sie gehört zur Familie der subtilisinähnlichen Serinproteasen und ist durch die klassische katalytische Triade (Asp-His-Ser) gekennzeichnet, die für die Hydrolyse von Peptidbindungen verantwortlich ist.
  • Das Enzym spaltet bevorzugt Peptidbindungen neben aromatischen und hydrophoben Aminosäureresten und ermöglicht dadurch den effektiven Abbau von Keratin und anderen schwer abbaubaren Proteinen.
  • Proteinase K wird als Präproprotein mit einem Signalpeptid und einem Propeptid synthetisiert. Diese werden proteolytisch entfernt, wodurch das aktive reife Enzym mit einer ungefähren Masse von 28,9 kDa (reife Form) entsteht; das vollständige Präprotein hat ein Molekulargewicht von etwa 40,3 kDa.
  • Ihre Stabilität und Aktivität werden durch die Bindung von Calcium erhöht, wodurch das Enzym vor Autolyse und thermischer Denaturierung geschützt wird; zwei Disulfidbrücken stabilisieren zusätzlich die Tertiärstruktur.
  • Es wurden dreidimensionale Strukturen aufgeklärt (z. B. durch PDB-Einträge), die eine typische Subtilisin-Faltung mit einer tiefen Substratbindungsspalte zeigen.
  • Aufgrund ihrer robusten proteolytischen Aktivität mit breitem Wirkungsspektrum wird Proteinase K in der Molekularbiologie häufig zur Entfernung von Proteinen während der Nukleinsäurereinigung sowie in verschiedenen industriellen Anwendungen eingesetzt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

  • Das Immunogen ist ein rekombinantes Proteinase-K-Protein, das sowohl native als auch denaturierte Epitope präsentieren kann. Berücksichtigen Sie dies bei der Auswahl zwischen nativen und denaturierenden Bedingungen für Ihren Assay.
  • Stellen Sie bei WB eine ordnungsgemäße Probenvorbereitung einschließlich geeigneter Lysepuffer und Proteaseinhibitoren sicher, um einen Abbau des Zielproteins zu vermeiden. Verwenden Sie einen geeigneten Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper und optimieren Sie die Blockierung, um den Hintergrund zu reduzieren.
  • Validieren Sie den ELISA mit bekannten positiven und negativen Kontrollen. Die Reaktivität des Antikörpers gegenüber nativem und beschichtetem Antigen kann unterschiedlich sein; berücksichtigen Sie daher Strategien zur Immobilisierung des Antigens.

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Produktdatenblatt

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