Anti-Prolyl Hydroxylase PHD1 (EGLN2) Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q96KS0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Prolyl-Hydroxylase EGLN2 (PHD1)

• EGLN2 (auch bezeichnet als PHD1, HIF-PH1, HPH-3, Estrogen-induziertes Tag 6) ist ein Mitglied der EglN-Familie der Prolyl-Hydroxylasen.
• Fungiert als zellulärer Sauerstoffsensor, der unter normoxischen Bedingungen spezifische Prolinreste in HIF1A und HIF2A hydroxyliert und diese für den proteasomalen Abbau über den VHL-Ubiquitinierungskomplex markiert; unter Hypoxie ist die Hydroxylierung abgeschwächt, sodass HIFs dem Abbau entgehen, in den Zellkern translozieren und die Expression hypoxischer Gene induzieren können. Dieser Weg reguliert die Hypoxietoleranz und Apoptose in Herz- und Skelettmuskulatur sowie die Empfindlichkeit gegenüber normoxischem oxidativen Neuronentod. Verwandte Referenzen: PMID:11595184, PMID:12039559, PMID:15925519, PMID:12181324
• Hydroxyliert auch Nicht-HIF-Substrate, einschließlich CEP192 (Zentrosomkomponente, die die Sauerstoffwahrnehmung mit dem Zellzyklus und der Bildung primärer Zilien verbindet), IKBKB (Aktivierung von NF-kappa-B unter Hypoxie) und ATF4 (Regulation der Proteinstabilität). Verwandte Referenzen: PMID:23932902, PMID:17114296
• Lokalisiert sich vorwiegend im Zellkern.
• Weit verbreitet exprimiert in adulten und fetalen Geweben mit höchsten Spiegeln in Gehirn, Plazenta, Lunge, Niere und Hoden; auch vorhanden in hormonresponsiven Epithelien von Brust-, Eierstock- und Prostata-Ursprung.
• Gehört zur Superfamilie der eisen- und 2-oxoglutaratabhängigen Dioxygenasen und benötigt molekularen Sauerstoff, Fe2+ und Ascorbat (Vitamin C) für die enzymatische Aktivität.
• Die posttranslationale Regulation umfasst Phosphorylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Reste 200–300 des humanen EGLN2 umfasst. Der resultierende polyklonale Antikörper erkennt möglicherweise bevorzugt die linearisierte oder denaturierte Form des Proteins und eignet sich gut für Western Blotting (WB).
• Für die Immunpräzipitation (IP) überprüfen Sie, ob das Ziel unter Ihren experimentellen Bedingungen in der nativen Konformation zugänglich ist; fügen Sie geeignete positive und negative Kontrollen hinzu.
• Bestätigen Sie bei ELISA-Anwendungen die Spezifität durch den Vergleich von Signalen aus rekombinanten Zielproteinen und irrelevanten Kontrollen.
• Angesichts der hohen Sequenzkonservierung zwischen humanem, murinem und rattem EGLN2 ist eine Kreuzreaktivität zu erwarten; validieren Sie dennoch die Reaktivität in Ihren spezifischen Probensystemen.
• Das beobachtete Molekulargewicht von EGLN2 beträgt ca. 44 kDa; verwenden Sie stets geeignete Molekulargewichtsmarker und bestätigen Sie die Bandenidentität mit einem geeigneten Ladungskontrollprotein.

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