Anti-Prolyl-Hydroxylase PHD1 (EGLN2) monoklonaler Antikörper für WB - Q96KS0

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Prolyl-Hydroxylase PHD1 (EGLN2)

• Die Prolyl-Hydroxylase EGLN2 (auch bekannt als PHD1, HIF-PH1 und EIT6) fungiert als zellulärer Sauerstoffsensor, der die Hydroxylierung von Prolinresten in Untereinheiten des Hypoxie-induzierbaren Faktors alpha (HIF-α) katalysiert und dabei bevorzugt das LXXLAP-Motiv erkennt. Zugehörige Referenzen: PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:15925519

• Unter normoxischen Bedingungen hydroxyliert EGLN2 spezifische Proline in den sauerstoffabhängigen Abbau-Domänen von HIF1A und HIF2A und zielt sie dadurch auf die VHL-vermittelte Ubiquitinierung und den proteasomalen Abbau ab, während Hypoxie diese Reaktion abschwächt, HIF-α stabilisiert und die hypoxische Genexpression fördert. Zugehörige Referenzen: PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:12181324 PMID:15925519

• Über die HIF-Regulation hinaus hydroxyliert EGLN2 weitere Substrate: CEP192, was die Sauerstoffsensorik mit der Zentrosomendynamik und der Bildung primärer Zilien verknüpft; IKBKB, das die NF-κB-Aktivierung bei Hypoxie vermittelt; und ATF4, was dessen Proteinstabilität reduziert (ATF4-Hydroxylierung durch Ähnlichkeit). Zugehörige Referenzen: PMID:23932902 PMID:17114296

• EGLN2 lokalisiert überwiegend im Zellkern, was mit seiner Rolle bei der Modulation von Transkriptionsfaktoren und nuklearen Signalereignissen übereinstimmt.

• Die Gewebeexpression ist breit gefächert, mit den höchsten Werten in adultem Gehirn, Plazenta, Lunge, Niere und Hoden; es ist auch in Herz, Leber, Skelettmuskulatur und hormonempfindlichen Geweben wie dem Epithel von Brust und Eierstöcken vorhanden.

• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitinierung, und das Protein benötigt Eisen und Vitamin C als Kofaktoren für seine Dioxygenase-Aktivität; eine alternative Initiierung erzeugt Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde unter Verwendung eines synthetischen Peptids erzeugt, das die N-terminalen Aminosäuren 1–100 des humanen EGLN2 abdeckt; er kann sowohl das Volllängenprotein als auch N-terminale Varianten erkennen. Berücksichtigen Sie einen Sequenzabgleich, wenn die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies oder Isoformen entscheidend ist.
• Für den Western Blot ist eine Bande bei etwa 44 kDa zu erwarten; validieren Sie den Nachweis in Ihrem spezifischen Probentyp unter Verwendung geeigneter Positiv- und Negativkontrollen.
• Der Antikörper ist für ELISA validiert und kreuzreagiert mit Proben von Mensch, Maus und Ratte, was translationale Studien erleichtert; eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und Nachweissysteme wird empfohlen.
• Da die EGLN2-Expression sauerstoffempfindlich ist, sollten Experimente unter normoxischen und hypoxischen Bedingungen durchgeführt werden, um hypoxieinduzierte Veränderungen zu beobachten, wobei bei Bedarf Reagenzien zur Stabilisierung von HIF-α verwendet werden sollten.

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