Anti-Progesteron-Rezeptor Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P06401

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Progesteron-Rezeptor-Funktion und -Lokalisation

• Der Progesteron-Rezeptor (PR), kodiert durch das PGR/NR3C3-Gen, gehört zur Superfamilie der Kernrezeptoren und ist ein Ligand-aktivierter Transkriptionsfaktor, der die Expression von Zielgenen als Reaktion auf Progesteron reguliert.
• PR existiert als zwei Haupt-Isoformen, PR-A und PR-B, die durch alternative Promotornutzung und alternatives Spleißen entstehen. PR-B enthält eine zusätzliche N-terminale Aktivierungsfunktionsdomäne (AF3), die in PR-A fehlt, was isoform-spezifische transkriptionelle Ergebnisse ermöglicht.
• Abhängig von der Isoform fungiert PR als transkriptioneller Aktivator oder Repressor. PR-B ist im Allgemeinen ein stärkerer Aktivator von Progesteron-responsiven Promotoren, während PR-A als transdominanter Repressor anderer Steroidhormonrezeptoren, einschließlich PR-B, Mineralocorticoid-Rezeptor (MR) und Östrogenrezeptor (ER), wirken kann.
• Nach Hormonstimulation ist PR an der Aktivierung der SRC-abhängigen MAPK-Signalübertragung beteiligt, was die Progesteronwirkung mit schnellen nicht-genomischen Signalkaskaden verbindet.
• PR wurde mit mitochondrialer Funktion in Verbindung gebracht; Progesteron-gebundener PR erhöht das mitochondriale Membranpotential und die zelluläre Atmung, was auf eine Rolle im Energiestoffwechsel hindeutet.
• Die subzelluläre Lokalisation von PR erstreckt sich auf den Zellkern, das Zytoplasma und die äußere Mitochondrienmembran, wobei der dynamische Shuttling durch Hormonbindung und posttranslationale Modifikationen beeinflusst wird.
• Die gewebespezifische Expression ist in reproduktiven Geweben hochreguliert: Im Uterusepithel dominiert während der Proliferationsphase die Isoform B, während die Isoform A die Hauptform im Stroma ist. Das Gleichgewicht zwischen den PR-Isoformen ist entscheidend für den normalen Menstruationszyklusverlauf und die Endometriumfunktion.
• PR unterliegt mehreren posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Palmitoylierung und SUMOylierung (Ubl-Konjugation), die seine Aktivität, Stabilität und seinen subzellulären Transport modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1–250 des humanen PR (NP_000917.3), einer Region, die die für die Isoform B einzigartige N-terminale Domäne und einen mit der Isoform A gemeinsamen Teil umfasst. Während der Antikörper beide Isoformen erkennen kann, sollten Sie die isoform-spezifische Detektion durch Überprüfung der Bandenmuster (vorhergesagte Molekulargewichte: PR-B ~116 kDa, PR-A ~94 kDa; beobachtete Banden können sich jedoch aufgrund von Modifikationen verschieben) im relevanten Probensystem in Betracht ziehen.
• Für Western Blotting verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie T47D- oder MCF-7-Brustkrebszelllinien oder Uterus-/Endometriumgewebe-Lysate. Das vorhergesagte Proteingewicht beträgt basierend auf dem UniProt-Eintrag 99 kDa, aber posttranslationale Modifikationen und Isoformunterschiede können zu mehreren Banden führen.
• Bei der Immunhistochemie (paraffineingebettete Schnitte, IHC-P) optimieren Sie die Antigen-Retrieval und Antikörperverdünnung mit Geweben bekannter PR-Expression (z. B. humanes Endometrium, Brustkarzinom). Eine Kernfärbung ist zu erwarten; zytoplasmatische oder mitochondriale Färbung kann ebenfalls beobachtet werden.
• Für ELISA stellen Sie sicher, dass die Beschichtungsantigen- oder Capture-Antikörper-Konfiguration mit der polyklonalen Detektion kompatibel ist; validieren Sie mit rekombinantem PR-Protein oder Zelllysaten.
• Es wird über Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte berichtet; aufgrund artspezifischer Sequenzvariationen sollte die Reaktivität jedoch in Ihrem experimentellen Modell bestätigt werden.

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