Anti-Progesteron-Rezeptor Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P06401

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung des Progesteron-Rezeptors

• Der Progesteron-Rezeptor (PR), codiert durch das PGR-Gen, ist ein Mitglied der Kernrezeptor-Unterfamilie 3, Gruppe C (NR3C3). Zwei Hauptisoformen, A und B, werden durch die Verwendung alternativer Promotoren und Spleißen erzeugt, die sich in ihren N-terminalen Regionen unterscheiden.
• Der PR fungiert als ein ligandenaktivierter Transkriptionsfaktor, der die Genexpression als Reaktion auf Progesteron reguliert und die Zellproliferation und -differenzierung in Zielgeweben steuert.
• Je nach Isoform kann der PR als Transkriptionsaktivator oder -repressor wirken. Isoform B vermittelt typischerweise die transkriptionelle Aktivierung, während Isoform A als transdominanter Repressor anderer Steroidhormonrezeptoren, einschließlich Östrogenrezeptor und Mineralocorticoidrezeptor, fungieren kann.
• Nach Hormonbindung aktiviert der PR eine SRC-abhängige MAPK-Signalgebung und trägt zu schnellen nicht-genomischen Effekten bei.
• Es wurde gezeigt, dass der PR im Zellkern, Zytoplasma und in der äußeren Mitochondrienmembran lokalisiert ist. Seine subzelluläre Verteilung kann je nach Isoform und zellulärem Kontext variieren.
• In Reproduktionsgeweben zeigen die Isoformen A und B unterschiedliche Expressionsmuster während des Menstruationszyklus, wobei Isoform A im Stroma überwiegt und Isoform B während der mid-sekretorischen Phase im Drüsenepithel erhalten bleibt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Palmitoylierung und SUMOylierung, welche die Stabilität, Lokalisierung und transkriptionelle Aktivität des Rezeptors modulieren.
• Die Progesteronsignalgebung über den PR ist mit einer Erhöhung des mitochondrialen Membranpotentials und der Zellatmung verbunden, was eine Rolle bei der metabolischen Regulation hervorhebt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 600–700, einen Bereich, der in beiden PR-A- und PR-B-Isoformen konserviert ist; daher wird vorhergesagt, dass der Antikörper beide Isoformen erkennt.
• Für Western Blotting wandert die Hauptbande für PR-B nahe 99 kDa, während PR-A typischerweise bei etwa 94 kDa beobachtet wird. Validieren Sie die Spezifität unter Verwendung positiver und negativer Zelllinien.
• Optimale Antikörperverdünnungen und Inkubationsbedingungen sollten empirisch für jedes experimentelle System bestimmt werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie in Betracht ziehen, rekombinantes PR-Protein oder Kernextrakte aus progesteronresponsiven Zellen zu beschichten, um die Leistung des Antikörpers zu bewerten.
• Fügen Sie immer geeignete Kontrollen ein und bestätigen Sie die Zielidentität über Sekundärmethoden, wenn Sie neue Probentypen untersuchen.

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