Anti-PRMT5 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O14744

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PRMT5

• PRMT5 ist eine Argininmethyltransferase vom Typ II, die die symmetrische Dimethylierung von Argininresten katalysiert, wobei sie eine höhere Präferenz für die Bildung von Monomethylarginin (MMA) als von symmetrischem Dimethylarginin (sDMA) hat (PubMed:10531356, PubMed:11152681, PubMed:11747828). Verwandte Referenzen: PMID:10531356, PMID:11152681, PMID:11747828
• Es methyliert spezifisch die Sm-Proteine D1 (SNRPD1) und D3 (SNRPD3) – diese Modifikation ist entscheidend für die Assemblierung und Biogenese von snRNP-Kernpartikeln und damit für das Prä-mRNA-Spleißen (PubMed:11747828, PubMed:12411503, PubMed:17709427). Verwandte Referenzen: PMID:11747828, PMID:12411503, PMID:17709427
• PRMT5 wirkt als transkriptioneller Korepressor durch Methylierung von Histon H4 an Arg-3 (H4R3) und Histon H3 an Arg-8; es bindet und reprimiert die Promotoren der Gamma-Globin-Gene HBG1/HBG2 gemeinsam mit LYAR (PubMed:25092918). Verwandte Referenzen: PMID:25092918
• Es ist lokalisiert in Zytoplasma, Kern, Chromosom und Golgi-Apparat, was auf seine Beteiligung sowohl an nukleären (Transkriptionsregulation, RNA-Spleißen) als auch zytoplasmatischen (Signaltransduktion) Prozessen hinweist.
• Wichtige Nicht-Histon-Substrate sind EGFR, RAF1, p53/TP53, POLR2A und Piwi-Proteine – über diese moduliert PRMT5 die EGF-Signaltransduktion, DNA-Schadensantworten und die Termination der RNA-Polymerase-II-Transkription (PubMed:21258366, PubMed:21917714, PubMed:19011621, PubMed:26700805). Verwandte Referenzen: PMID:21258366, PMID:21917714, PMID:19011621, PMID:26700805

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1-100 von humanem PRMT5 entspricht. Der Antikörper erkennt voraussichtlich die N-terminale Region; wenn eine genaue Kartierung erforderlich ist, sollte das Epitop überprüft werden.
• Für die Western Blotting wird eine Bande von ca. 73 kDa vorhergesagt; verwenden Sie als Positivkontrolle Ganzzelllysate aus Zelllinien, die bekanntermaßen PRMT5 exprimieren (z. B. HeLa, HEK293).
• Für die Immunhistochemie (paraffin-eingebettete Schnitte) können standardmäßige Antigen-Retrieval-Protokolle (z. B. Citratpuffer, pH 6,0) erforderlich sein; validieren Sie die Färbung in einem relevanten Gewebepanel.
• Aufgrund der hohen Sequenzkonservierung bei Mensch, Maus und Ratte wird eine Kreuzreaktivität erwartet; validieren Sie jedoch immer in der von Ihnen verwendeten Spezies und dem gewünschten experimentellen System.

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