Anti-PRKCQ (nPKC-theta) polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, ELISA - Q04759

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: PRKCQ-Funktion und Lokalisierung

• PRKCQ (nPKC-theta) ist eine calciumunabhängige, Phospholipid- und Diacylglycerol (DAG)-abhängige Serin/Threonin-Proteinkinase, die eine nicht-redundante Rolle bei der T-Zell-Rezeptor (TCR)-Signalübertragung spielt, einschließlich T-Zell-Aktivierung, Proliferation, Differenzierung und Überleben.
• In TCR/CD28-kostimulierten T-Zellen wird PRKCQ für die Aktivierung von NF-kappa-B und JUN benötigt, welche die IL2-Produktion vorantreiben; zudem ist es an der calciumabhängigen Transaktivierung von NFATC1 und NFATC2 beteiligt. Zugehörige Referenzen: PMID:21964608
• Es vermittelt die Aktivierung des kanonischen NF-kappa-B-Signalwegs durch direkte Phosphorylierung von CARD11, was zur Rekrutierung des BCL10-MALT1-Komplexes und zur IKK-Aktivierung führt, und beeinflusst indirekt den nicht-kanonischen NF-kappa-B-Signalweg.
• Während der T-Zell-Differenzierung ist PRKCQ entscheidend für die Entwicklung von T-Helfer-2 (Th2)-Zellen und proinflammatorischen Th17-Zellen, mit einer untergeordneten Rolle bei Th1-Antworten.
• In Blutplättchen reguliert PRKCQ die Signaltransduktion stromabwärts von Integrin ITGA2B und Thrombinrezeptoren, was die „Outside-in“-Signalübertragung und die Granulasekretion fördert.
• PRKCQ phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten: Es phosphoryliert CBLB, um dessen Abbau zu fördern, BAD, um das Überleben sichernde Signale zu vermitteln, und IRS1, um unter anderem die Insulinsignalisierung zu modulieren.
• Es phosphoryliert CCDC88A/GIV und hemmt dessen Guaninnukleotid-Austauschfaktor-Aktivität, was die Zellmigration und Signalübertragung beeinflusst. Zugehörige Referenzen: PMID:23509302
• Phosphoryliert und aktiviert LRRK1, welches wiederum RAB-Proteine phosphoryliert, die am intrazellulären Transport beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:36040231
• Das Protein lokalisiert im Zytoplasma und an der Zellmembran, was mit seiner Rolle bei der Signaltransduktion übereinstimmt.
• PRKCQ wird in der Skelettmuskulatur, T-Zellen, megakaryoblastischen Zellen und Blutplättchen exprimiert und enthält charakteristische Kinasedomänen, Zinkfinger-Motive sowie regulatorische Phosphorylierungs-/Ubiquitinierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das den N-terminalen Bereich (Aminosäuren 1-230) des humanen PRKCQ abdeckt. Dieses Design kann das Vollprotein und potenzielle Isoformen nachweisen; validieren Sie dies mit geeigneten Kontrollen in Ihrem System.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 82 kDa. Verwenden Sie geeignete Ladekontrollen und optimieren Sie die Antikörperverdünnung für Ihre spezifischen Lysate.
• Die Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte ermöglicht studienübergreifende Ansätze. Führen Sie erste Titrationsexperimente in jeder Spezies durch, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.
• Bei ELISA-Anwendungen können direkte oder indirekte Nachweismethoden verwendet werden. Stellen Sie sicher, dass die Antigenbeschichtung und die Antikörperpaarung für Ihr Assay-Format und Ihre Empfindlichkeitsanforderungen optimiert sind.
• Der Versand erfolgt auf Eisbeuteln; lagern Sie das Produkt nach Erhalt wie empfohlen und minimieren Sie Gefrier-Auftau-Zyklen, um die Integrität des Antikörpers zu erhalten.

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