Anti-PRKAR2B Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P31323

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PRKAR2B-Funktion und Lokalisierung

• PRKAR2B kodiert für die Typ II-beta regulatorische Untereinheit der cAMP-abhängigen Proteinkinase (PKA), ein Schlüsselenzym in cAMP-Signalwegen.
• Diese regulatorische Untereinheit bindet cAMP, und nach der Bindung setzt sie die katalytischen Untereinheiten frei, was zur PKA-Aktivierung und Phosphorylierung nachgeschalteter Zielmoleküle führt.
• Typ II regulatorische Ketten vermitteln Membranassoziation durch Bindung an Verankerungsproteine, einschließlich MAP2-Kinase, und lokalisieren so die PKA-Aktivität in spezifische subzelluläre Kompartimente.
• Das Protein ist hauptsächlich im Zytoplasma lokalisiert und assoziiert auch mit der Zellmembran.
• Die Gewebeexpression von PRKAR2B ist variabel; es stellt einen von vier regulatorischen Untereinheitstypen (I-alpha, I-beta, II-alpha, II-beta) dar, die gewebespezifische Expressionsmuster aufweisen.
• PRKAR2B enthält zwei cAMP-Bindungsdomänen und wird durch Phosphorylierung reguliert (in Proteomikstudien als Phosphoprotein identifiziert).
• Schlüsselwörter von UniProt: cAMP, cAMP-Bindung, Zellmembran, Zytoplasma, Membran, Nukleotidbindung, Phosphoprotein, Proteomik-Identifikation, Referenzproteom, Wiederholung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 319–418 umfasst, was einer Region nahe dem C-Terminus von PRKAR2B entspricht. Erwägen Sie, die Antikörperspezifität mittels Peptid-Kompetitions-Assays oder durch Testung in PRKAR2B-Knockout/Knockdown-Zelllysaten zu überprüfen.
• Für Western Blot sollte ein erwartetes Band bei etwa 46 kDa (konsistent mit dem berechneten Molekulargewicht von 46.302 Da) detektiert werden. Fügen Sie geeignete Ladekontrollen hinzu und bestätigen Sie die Bandenidentität mit relevanten biologischen Proben.
• Bei der Immunhistochemie (paraffineingebettet, IHC-P) müssen die Antigen-Retrieval-Bedingungen möglicherweise optimiert werden; testen Sie Citrat- oder EDTA-basierte Protokolle an bekannten Positivkontrollgeweben.
• Für ELISA-Anwendungen legt das peptidbasierte Immunogen nahe, dass der Antikörper lineare Epitope erkennen könnte; ein direkter oder Sandwich-ELISA-Format kann evaluiert werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PRKAR2B wurde berichtet; validieren Sie im relevanten Probensystem, um eine konsistente Detektion über Spezies hinweg sicherzustellen.

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