Anti-Prdm9 Kaninchen monoklonaler Antikörper für IHC-P, ELISA, CUT&Tag - Q96EQ9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PRDM9-Funktion und -Lokalisierung

• PRDM9 (auch bekannt als Meisetz, Hst1 oder Hybrid-Sterilitätsprotein 1) ist eine Histon-Methyltransferase, die sequenziell H3K4 und H3K36 mono-, di- und tri-methyliert, um H3K4me3 und H3K36me3 zu erzeugen, und spielt eine zentrale Rolle bei der Bestimmung von meiotischen Hotspots und der Rekombination. Verwandte Referenzen: PMID:16292313 PMID:24095733 PMID:24785241
• Neben H3 kann PRDM9 Histon H4 bei Lys20 (H4K20me1/me2) mono- und di-methylieren und H3K9 tri-methylieren, wobei H3K9me2 das bevorzugte Substrat ist. Verwandte Referenzen: PMID:24785241 PMID:27362481
• Während der meiotischen Prophase bindet PRDM9 spezifische DNA-Motive über sein C-terminales Zinkfinger-Array und lenkt die lokale Anreicherung von H3K4me3 und H3K36me3 auf benachbarten Nukleosomen. Verwandte Referenzen: PMID:22028627 PMID:27362481 PMID:29478809
• Diese Landschaft der Histonmodifikation fördert die Bildung von programmierten DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs) an PRDM9-gebundenen Hotspots und initiiert die meiotische Rekombination. Verwandte Referenzen: PMID:16292313 PMID:29478809
• PRDM9 interagiert während der Meiose mit mehreren Proteinkomplexen: Es assoziiert in der frühen Leptonema mit CDYL und EHMT2 und rekrutiert später EWSR1 und CXXC1, die Hotspots über REC8 mit der Chromosomenachse verbinden. Verwandte Referenzen: PMID:27932493 PMID:25894966
• Neben seiner Rolle bei der Rekombination fungiert PRDM9 als transkriptioneller Aktivator in der frühen meiotischen Prophase und nutzt H3K4me3 und H3K36me3 als epigenetische Markierungen für die Genaktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:16292313
• PRDM9 unterliegt einer Automethylierung, und seine Methyltransferase-Aktivität kann durch Acetylierung oder Phosphorylierung von Histon H3 abgeschwächt werden. Verwandte Referenzen: PMID:28126738 PMID:27362481
• PRDM9 wird spezifisch in Keimzellen exprimiert, die in die meiotische Prophase eintreten, in weiblichen fetalen Gonaden und postnatalen Hoden, und lokalisiert sich im Kern und an den Chromosomen. Verwandte Referenzen: PMID:16292313 PMID:27932493

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Dieser Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erzeugt, das die Aminosäuren 87–370 von murinem PRDM9 umfasst, einen Bereich, der die PR/SET-Domädomäne enthält und das hochrepetitive Zinkfinger-Array ausschließt, was die Zielspezifität erhöhen kann.
• Er wurde für die Verwendung in IHC-P, ELISA und CUT&Tag-Anwendungen gemeldet; erwägen Sie die Optimierung der Antikörpertiter und Assay-Bedingungen für Ihr spezifisches Modellsystem.
• Angesichts der beobachteten Kreuzreaktivität mit humanem PRDM9 kann dieser Antikörper in der Humanprobenanalyse eingesetzt werden; jedoch wird eine unabhängige Validierung im entsprechenden Gewebe oder Zelltyp empfohlen.
• Das vorhergesagte Molekulargewicht von PRDM9 beträgt ca. 97 kDa; für Western-Blot-Anwendungen, die noch nicht aufgeführt sind, testen Sie ein Panel positiver Kontrollen wie Lysate meiotischer Keimzellen.
• Für IHC-P sollten Antigen-Retrieval-Methoden und Detektionssysteme unter Verwendung von Gewebeschnitten, die bekanntermaßen PRDM9 exprimieren (wie Hoden oder fetaler Eierstock), standardisiert werden.

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