Anti-PPP4C-Kaninchen-Polyklonalantikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA – P60510

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PPP4C

• PPP4C kodiert die katalytische Untereinheit der Serin/Threonin-Proteinphosphatase 4 (PP4), die auch als Proteinphosphatase X (PP-X) bekannt ist. Sie gehört zur PPP-Familie der Proteinphosphatasen.
• PP4 ist ein multifunktionales Enzym, das an wichtigen zellulären Prozessen beteiligt ist, darunter die Mikrotubuli-Organisation an Zentrosomen, die Reifung spliceosomaler snRNPs, Apoptose, DNA-Reparatur und die Signalübertragung des Tumornekrosefaktors (TNF)-alpha.
• Die PP4-Holoenzymkomplexe, wie PPP4C-PPP4R1 und PPP4C-PPP4R2-PPP4R3A, regulieren die Histon-Deacetylierung durch Dephosphorylierung von HDAC3 und sind an der DNA-Schadensantwort beteiligt, indem sie Gamma-H2AX spezifisch an Ser-140 dephosphorylieren.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst das Zytoplasma, den Zellkern und die Zentrosomen und steht im Einklang mit den Funktionen des Proteins bei der Zellzyklusprogression, der Signalübertragung von DNA-Schadens-Checkpoints und der Organisation des Zytoskeletts.
• PPP4C dephosphoryliert NDEL1 an CDK1-Phosphorylierungsstellen, wodurch die CDK1-Aktivität während der Interphase negativ reguliert wird, und dephosphoryliert RPA2, um die Rekrutierung von RAD51 an das Chromatin für die homologe Rekombinationsreparatur zu erleichtern.
• Die katalytische Aktivität erfordert Manganionen als Kofaktoren, und das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Methylierung.
• Zu den weiteren Funktionen gehören die Aktivierung der c-Jun-N-terminalen Kinase MAPK8, die Regulation der NF-kappa-B-Aktivierung und die Modulation der Zellmigration, wodurch PP4 in Immun- und Metastasierungswege involviert ist.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht dem vollständigen humanen PPP4C (Aminosäuren 1–307), wodurch sich dieser polyklonale Antikörper für den Nachweis von endogenem PP4 in verschiedenen Anwendungen eignet.
• Beim Western Blot (WB) wird eine Bande bei ungefähr 35 kDa erwartet. Die Verwendung von Phosphataseinhibitoren sowie Positivkontrolllysaten aus HeLa- oder HEK293-Zellen sollte in Betracht gezogen werden.
• Bei der Immunhistochemie an Paraffinschnitten (IHC-P) sollten die Antigen-Retrieval-Bedingungen und die Antikörperverdünnung entsprechend den gewebespezifischen Expressionsmustern optimiert werden. Eine Färbung im Zellkern und im Zytoplasma kann beobachtet werden.
• Für die Immunpräzipitation (IP) kann der Antikörper native PPP4C-Komplexe binden. Die Antikörperkonzentration sollte titriert und ein ausreichendes Waschen sichergestellt werden, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Die Kreuzreaktivität mit Orthologen von Maus und Ratte wurde validiert, wodurch Studien in gängigen Modellorganismen ermöglicht werden.

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