Anti-PPP1R14A (CPI-17) polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB und ELISA - Q96A00

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PPP1R14A

• Die Protein-Phosphatase-1-regulatorische Untereinheit 14A (PPP1R14A), auch bekannt als CPI-17, ist ein potenter Inhibitor der katalytischen Untereinheit der Protein-Phosphatase 1 (PPP1CA).
• Die Phosphorylierung von CPI-17 verstärkt dessen inhibitorische Aktivität um das über 1000-fache und fungiert als molekularer Schalter, der die Substratphosphorylierung durch PPP1CA moduliert und dadurch die Kontraktion der glatten Muskulatur reguliert.
• Das Protein existiert in mindestens zwei Isoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen; Isoform 1 wird in Aorta und Hoden nachgewiesen, während Isoform 2 in der Aorta vorkommt.
• PPP1R14A lokalisiert im Zytoplasma, was mit seiner Rolle bei der Regulierung der zytosolischen Phosphatase-Aktivität übereinstimmt.
• Als Phosphoprotein wird seine Aktivität wahrscheinlich durch Kinasen wie die Proteinkinase C (PKC) gesteuert, was es zu einem Schlüsselknotenpunkt in Signaltransduktionswegen macht, die den Muskeltonus steuern.
• Die posttranslationale Phosphorylierung und seine Aktivität als Phosphatase-Inhibitor unterstreichen seine Bedeutung in der Proteomik und der Forschung zur zellulären Signalübertragung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das das vollständige menschliche PPP1R14A (AS 1–147) umfasst. Daher wurde der Antikörper gegen das gesamte Protein entwickelt und kann sowohl phosphorylierte als auch unphosphorylierte Formen erkennen; verwenden Sie Phosphatase-Inhibitoren bei der Probenvorbereitung, falls der Phosphorylierungszustand relevant ist.
• Für Western Blotting wird eine Bande bei etwa 17 kDa erwartet. Erwägen Sie die Verwendung geeigneter Positivkontrollen wie Lysate aus glattem Muskelgewebe (z. B. Aorta) oder Zelllinien, die PPP1R14A exprimieren.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für den direkten oder indirekten Nachweis eingesetzt werden, jedoch müssen die optimalen Arbeitsverdünnungen experimentell bestimmt werden. Die Paarung mit einem spezifischen Anti-CPI-17-Detektionsantikörper kann die Sensitivität verbessern.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde berichtet, was translationale Studien in Nagetiermodellen erleichtert; eine Validierung in der entsprechenden Spezies und dem entsprechenden Gewebe wird jedoch vor groß angelegten Experimenten empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Kaninchen-Antikörper handelt, können geringfügige chargenabhängige Variationen auftreten; fügen Sie jedem Experiment eine standardisierte Kontrollprobe bei, um die Konsistenz zu gewährleisten.

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