Anti-PPM1A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P35813

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PPM1A-Funktion und Lokalisation

• PPM1A (Proteinphosphatase 1A), auch bekannt als PP2Cα oder PP2CA, ist eine Serin/Threonin-Phosphatase, die durch das PPM1A-Gen beim Menschen kodiert wird. Es gehört zur PP2C-Familie der metallabhängigen Proteinphosphatasen.
• Es fungiert als Enzym mit breiter Spezifität, das den TGF-beta-Signalweg negativ reguliert, indem es SMAD2 und SMAD3 dephosphoryliert, was zu deren Dissoziation von SMAD4 und nuklearem Export führt und damit das Signal beendet.
• PPM1A spielt eine entscheidende Rolle bei der Dämpfung der TNF-vermittelten NF-kappa-B-Aktivierung durch Dephosphorylierung und Inaktivierung der IKBKB/IKKβ-Kinase.
• Es dephosphoryliert auch AMPK-Untereinheiten PRKAA1 und PRKAA2, was auf eine Beteiligung an Energiehomöostasewegen hindeutet.
• Subzellulär ist PPM1A im Zellkern, Zytoplasma, Zytosol und membrangebundenen Kompartimenten zu finden, was mit seinen vielfältigen Signalrollen übereinstimmt.
• Das Protein unterliegt alternativem Spleißen, wird myristoyliert und ist selbst phosphoryliert. Für die katalytische Aktivität benötigt es Magnesium- oder Manganionen als Kofaktoren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (aa 161-370) von humanem PPM1A, was Spezifität für die kanonische PP2Cα-Isoform verleihen kann; die Leistung im relevanten Proben-System sollte überprüft werden.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 42 kDa; das Laden geeigneter positiver Kontrollen (z.B. HeLa- oder HEK293-Lysate) und die Optimierung der Blockierbedingungen sollten in Betracht gezogen werden.
• Für Immunfluoreszenz/ICC können Permeabilisierungs- und Fixierungsmethoden die Detektion nuklearer und zytoplasmatischer Pools beeinflussen; Co-Lokalisierungsmarker sollten validiert werden.
• Bei Verwendung in ELISA kann der Antikörper sowohl als Capture- als auch als Detektionsreagenz geeignet sein; eine Kreuztitration sollte durchgeführt werden, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.
• Da die Kreuzreaktivität für Human, Maus und Ratte bestätigt ist, sollte das speziesspezifische Signal mit endogenen Gewebeextrakten oder Zelllinien validiert werden.

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