Anti-PPAT polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q06203

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PPAT

• PPAT, auch bekannt als Glutamin-Phosphoribosylpyrophosphat-Amidotransferase (GPAT), ist das Enzym, das den ersten verpflichtenden Schritt der de-novo-Purinbiosynthese katalysiert.
• Es wandelt Phosphoribosylpyrophosphat (PRPP) und Glutamin in Phosphoribosylamin um, eine kritische Vorstufe für die Purinnukleotidsynthese.
• Das Enzym enthält einen 4Fe-4S-Eisen-Schwefel-Cluster und benötigt Magnesium als Kofaktor für die katalytische Aktivität.
• PPAT unterliegt allosterischer Regulation und posttranslationaler Acetylierung, die seine Aktivität als Reaktion auf zelluläre Nukleotidanforderungen modulieren.
• Seine ubiquitäre Expression spiegelt die Haushaltsfunktion der Purinbiosynthese in allen Geweben wider.
• Mit einem Molekulargewicht von etwa 57 kDa (57,4 kDa aus der Sequenz vorausgesagt) ist PPAT ein häufiges Ziel in proteomischen Studien.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für das Western Blotting beträgt der empfohlene Startverdünnungsbereich 1:500 bis 1:2000; eine Optimierung ist unerlässlich, um spezifische und klare Signale zu erzielen.
• Positive Kontrolllysate können aus weitverbreiteten Zelllinien (z. B. HeLa, HEK293) oder Maus-/Rattengeweben hergestellt werden, da PPAT ubiquität exprimiert wird.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC sollten geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle getestet werden, um die Zugänglichkeit des Antikörpers zum Ziel zu gewährleisten.
• Bei der Verwendung für ELISA sollte eine Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper in Betracht gezogen und in der relevanten Probenmatrix validiert werden.
• Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-PPAT wurde beobachtet; dennoch wird eine individuelle Validierung im spezifischen Experimentalsystem empfohlen.

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