Anti-PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P30153

Wichtige Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A

• PR65/PPP2R1A ist die Alpha-Isoform der 65 kDa großen regulatorischen Untereinheit A der Serin/Threonin-Proteinphosphatase 2A (PP2A), kodiert durch das Gen PPP2R1A (alternative Namen: PP2AA, PR65A). Es fungiert als Gerüstmolekül, das den Zusammenbau der katalytischen Untereinheit und einer variablen regulatorischen B-Untereinheit koordiniert. Zugehörige Referenzen: PMID:15525651, PMID:16580887, PMID:33243860
• Das Protein ist essenziell für die korrekte Chromosomensegregation und die zentromere Lokalisierung von SGO1 während der Mitose, wodurch die genetische Stabilität gewährleistet wird. Zugehörige Referenzen: PMID:16580887
• Durch seine Gerüstfunktion ist PR65/PPP2R1A ein Schlüsselbestandteil der STRIPAK-Komplexe (Striatin-interagierende Phosphatase und Kinase), die Signalwege wie Hippo, MAPK und nukleäre Rezeptorwege regulieren und an Zellwachstum, Differenzierung und Apoptose beteiligt sind. Zugehörige Referenzen: PMID:18782753, PMID:33633399
• Als Teil des Integrator-PP2A (INTAC)-Komplexes vermittelt es einen Qualitätskontrollpunkt während der Transkriptionselongation, indem es die Dephosphorylierung der C-terminalen Domäne (CTD) der RNA-Polymerase II und des Elongationsfaktors SUPT5H/SPT5 fördert, was zum vorzeitigen Abbruch ungünstig konfigurierter Transkripte führt. Zugehörige Referenzen: PMID:33243860, PMID:34004147
• Zusammen mit dem RACK1-Adapter vermittelt PR65/PPP2R1A die Dephosphorylierung von AKT1 an Ser-473, wodurch die AKT1-Aktivierung und die nachgeschaltete mTOR-Signalisierung verhindert werden; diese Aktivität ist entscheidend für die Homöostase regulatorischer T-Zellen.
• PR65/PPP2R1A lokalisiert in verschiedenen subzellulären Kompartimenten, einschließlich Zytoplasma, Zellkern, Zentromeren, lateraler Zellmembran und Dendriten, was seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• Das Protein enthält HEAT-Repeats und unterliegt einer Acetylierung; es wird durch direkte Proteinsequenzierung identifiziert und ist an Krankheitsvarianten, einschließlich geistiger Behinderung, sowie an Wirt-Virus-Interaktionen beteiligt.
• Reguliert die Rekrutierung des SKA-Komplexes an Kinetochore und trägt so zum Aufbau der mitotischen Spindel und zur Chromosomenausrichtung bei. Zugehörige Referenzen: PMID:28982702

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1-270 des humanen PP2A-Aα/PR65α/PPP2R1A, einer Region, die mehrere HEAT-Repeats enthält; die Leistung des Antikörpers kann durch posttranslationale Modifikationen oder isoformspezifische Unterschiede beeinflusst werden. Validieren Sie die Spezifität im relevanten Probensystem.
• Für den Western Blot wird in Zelllysaten von Mensch, Maus und Ratte eine erwartete Bande bei etwa 65 kDa beobachtet. Verwenden Sie geeignete Kontrollen und berücksichtigen Sie die nukleäre und zytoplasmatische Verteilung des Proteins.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC können punktförmige nukleäre und zentromere Signale beobachtet werden; Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten optimiert werden, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten.
• ELISA-Anwendungen erfordern möglicherweise die Beschichtung mit dem rekombinanten Immunogen oder dem nativen Protein; Titrationsexperimente werden empfohlen, um die optimalen Antikörperverdünnungen zu bestimmen.

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