Anti-PORCN Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB und ELISA - Q9H237

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PORCN

• PORCN, auch bekannt als Protein-Serin-O-Palmitoleoyltransferase Porcupine oder Protein MG61, wird beim Menschen durch das PORCN-Gen kodiert (auch bezeichnet als MG61, PORC, PPN).
• PORCN ist ein wichtiger Regulator des kanonischen Wnt-Signalwegs, indem es die Anheftung von Palmitoleat (eine 16-kohlenstoffhaltige einfach ungesättigte Fettsäure) an Wnt-Proteine katalysiert – dieser Schritt ist essenziell für deren Sekretion und Rezeptorbindung.
• Als Acyltransferase gehört PORCN zur Familie der membrangebundenen O-Acyltransferasen und enthält mehrere Transmembranhelices, die es an Organellenmembranen verankern.
• PORCN lokalisiert spezifisch an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, wo es Wnt-Liganden vor deren Transport und Freisetzung modifiziert.
• Aufgrund von alternatives Spleißen existieren mehrere PORCN-Isoformen: Isoform 1 wird prominent in fötalen und erwachsenen Gehirnregionen, Herz, Skelettmuskel und Hoden exprimiert, während Isoform 4 in anderen Geweben wie Niere, Leber, Lunge und Milz nachgewiesen wird.
• Mutationen in PORCN sind mit fokaler dermaler Hypoplasie (Goltz-Syndrom) verbunden, was seine zentrale Rolle in der Entwicklung unterstreicht und es mit dem Krankheitsvarianten-Schlüsselwort verbindet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Da das Immunogen den Aminosäuren 220-320 des humanen PORCN entspricht, kann dieser Antikörper eine Sequenz im C-terminalen Bereich des Proteins erkennen; für das Western Blotting empfehlen wir die Verwendung reduzierender Bedingungen und eine Positivkontrolle aus Lysaten von Geweben mit hoher PORCN-Expression wie Hoden oder Gehirn.
• Für ELISA-Anwendungen empfehlen wir die Optimierung der Beschichtungsantigenkonzentration und der Antikörperverdünnung mittels Checkerboard-Titration sowie die Validierung der Spezifität mittels rekombinantem PORCN-Protein oder Peptid-Blocking.
• Da PORCN ein niedrig abundantes Transmembranprotein ist, kann die Anreicherung von Membranfraktionen oder eine Immunpräzipitation vor dem WB die Detektionsempfindlichkeit verbessern.
• Obwohl Kreuzreaktivität mit PORCN von Maus und Ratte nachgewiesen wurde, empfehlen wir die Bestätigung der Reaktivität in Ihrem spezifischen Experimentalsystem aufgrund möglicher Epitopvariabilitäten.

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