Anti-POMGNT1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q8WZA1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: POMGNT1-Funktion und -Lokalisierung

• POMGNT1 (Protein O-linked-mannose beta-1,2-N-acetylglucosaminyltransferase 1) ist eine im Golgi-Apparat ansässige Glykosyltransferase, auch als GnT I.2 bezeichnet, die für den O-Mannosyl-Glykan-Weg essentiell ist.
• POMGNT1 katalysiert die Übertragung von N-Acetylglucosamin (GlcNAc) auf O-verknüpfte Mannose-Reste am Alpha-Dystroglykan und anderen O-mannosylierten Proteinen und bildet den GlcNAc(β1-2)Man(α1-)O-Ser/Thr-Kern. Es ist spezifisch für alpha-verknüpftes terminales Mannose und weist keine MGAT3/4/5/7/8-Aktivität auf (PubMed:11709191, PubMed:27493216, PubMed:28512129). Verwandte Referenzen: PMID:11709191 PMID:27493216 PMID:28512129
• Das Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, was zu mehreren Isoformen führt, die zur gewebsspezifischen Regulation der O-Mannosylierung beitragen können.
• POMGNT1 ist über eine Signal-Anker-Transmembrandomäne in der Membran des Golgi-Apparats verankert, wo es seine Glykosylierungsfunktion ausübt.
• Es wird konstitutiv exprimiert, wobei relativ höhere Spiegel im Rückenmark, in den Lymphknoten und in der Luftröhre nachgewiesen wurden; eine starke Expression wird in Astrozyten sowie in unreifen und reifen Neuronen beobachtet.
• Mutationen in POMGNT1 verursachen ein Spektrum an Dystroglykanopathien, einschließlich kongenitaler Muskeldystrophie, Gliedergürtel-Muskeldystrophie (LGMD2O/LGMDR15) und Retinitis pigmentosa.
• Das Protein enthält strukturelle Merkmale, die für Glykosyltransferasen typisch sind: Disulfidbrücken, Phosphorylierungsstellen und eine manganabhängige Metalldomäne.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 411–660 von humanem POMGNT1 (C-terminale Region); der resultierende polyklonale Antikörper kann mehrere Isoformen erkennen und eignet sich zum Nachweis des Volllängenproteins (~75 kDa).
• Für den Western Blot sollte die Verwendung von Proteinlysaten aus menschlichen, murinen oder rattengeweblichen Proben mit bekannter POMGNT1-Expression (z. B. Gehirn, Skelettmuskel) in Betracht gezogen werden, validiert mit positiven und negativen Kontrollen.
• Bei der Durchführung eines ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz bewertet werden; geeignete Blockierungsschritte sollten einbezogen und die Verdünnungsfaktoren für Ihr spezifisches Assay-Format optimiert werden.
• Wie bei jedem polyklonalen Antikörper sollte die Chargen-zu-Chargen-Konsistenz überprüft werden, und eine weitere Optimierung der Verdünnung wird für jede Anwendung und jeden Probentyp empfohlen.

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