Anti-POLR3K Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Y2Y1

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: POLR3K-Funktion und -Lokalisierung

• DNA-gerichtete RNA-Polymerase III-Untereinheit RPC10 (auch bekannt als POLR3K, RPC10, RPC11, RPC12.5) ist eine Kernkomponente der RNA-Polymerase III (Pol III) (PubMed:20413673, PubMed:30584594, PubMed:33335104).
  Verwandte Referenzen: PMID:20413673, PMID:30584594, PMID:33335104

• Pol III synthetisiert kleine nicht-kodierende RNAs und spielt eine entscheidende Rolle für die Transkriptionsgenauigkeit durch Vermittlung des Korrekturlesens und der Spaltung fehlerhaft eingebauter Nukleotide (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Verwandte Referenzen: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• Beim Erreichen des Poly(dT)-Terminationssignals induziert POLR3K das Öffnen der Pol III-Klammer und die Transkriptionstermination (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Verwandte Referenzen: PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• POLR3K fungiert als nuklearer und zytosolischer DNA-Sensor, der an der angeborenen Immunantwort beteiligt ist; es erkennt fremde dsDNA von intrazellulären Bakterien und DNA-Viren, was zur Transkription in dsRNA führt, die über RIG-I die Typ-I-Interferon- und NF-kappa-B-Signalwege auslöst (PubMed:19609254, PubMed:19631370).
  Verwandte Referenzen: PMID:19609254, PMID:19631370

• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nuklear.

• Enthält Zinkfinger-Motive und ist ein Metall-bindendes Protein, das für seine katalytische Aktivität essentiell ist.

• Mutationen in POLR3K sind mit Leukodystrophie und Neurodegeneration assoziiert, was seine Bedeutung für die neurologische Gesundheit unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-108 des humanen POLR3K (NP_057394.3) abdeckt, was das vollständige Protein umfasst. Dieses Design sollte Antikörper hervorbringen, die sowohl die native als auch die denaturierte Form erkennen und damit WB- und ELISA-Anwendungen unterstützen.
• Für den Western Blot sollten humane Zelllysate (z.B. HeLa, HEK293) als positive Kontrollen in Betracht gezogen werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 12 kDa, aber die endogenen Expressionsniveaus können variieren; eine Optimierung der Primärantikörperverdünnung und Inkubationsbedingungen wird empfohlen.
• Führen Sie bei der Durchführung von ELISA eine Validierung des Antikörpers mit dem Immunogen oder Peptid durch, um eine Standardkurve zu erstellen. Die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet, bestätigen Sie daher die Spezifität in Ihrem Modellsystem.
• Als polyklonaler Antikörper kann es von Charge zu Charge zu Schwankungen kommen; wir empfehlen, interne Kontrollen einzubeziehen und für kritische Experimente eine chargenspezifische Validierung durchzuführen.

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