Anti-POLR2D-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – O15514

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von POLR2D

• POLR2D (DNA-gerichtete RNA-Polymerase-II-Untereinheit RPB4, auch bekannt als RBP4, RPB16) ist eine Kernuntereinheit der humanen RNA-Polymerase II (Pol II), des zentralen Enzyms, das für die Synthese von mRNA-Vorläufern und vielen nicht-kodierenden RNAs verantwortlich ist.
• Als Bestandteil eines konservierten Subkomplexes mit POLR2G/RPB7 bindet POLR2D an eine von den Untereinheiten RPB1, RPB2 und RPABC2 gebildete Tasche nahe der Basis des Pol-II-Klemmelements. Dadurch trägt es dazu bei, die Klemme in einer geschlossenen Konformation zu fixieren und zu verhindern, dass doppelsträngige DNA vorzeitig in den Spalt des aktiven Zentrums eintritt.
• Der POLR2D/POLR2G-Subkomplex interagiert außerdem mit einzelsträngiger DNA und RNA, was auf eine Rolle bei der Handhabung von Nukleinsäuren während der Transkriptionsinitiation oder -elongation hindeutet.
• POLR2D ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle in der Transkriptionsmaschinerie übereinstimmt.
• Das Protein ist Gegenstand von Strukturstudien (Schlüsselwort: 3D-Struktur) und wurde mittels massenspektrometriebasierter Proteomik identifiziert, was seine stabile Integration in Pol II unterstützt.
• Für POLR2D wurden keine gewebespezifischen Isoformen oder posttranslationalen Modifikationen berichtet, was auf eine relativ einheitliche Funktion über verschiedene Zelltypen hinweg schließen lässt.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen besteht aus einem rekombinanten Protein, das die Aminosäuren 1–142 des humanen POLR2D umfasst. Diese N-terminale Region ist hochkonserviert, was möglicherweise die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Maus und Ratte erklärt.
• Bei der Western-Blot-Analyse (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von POLR2D etwa 16 kDa. Verwenden Sie ein Gel mit hohem Acrylamidanteil oder ein Gradientengel, um eine klare Trennung von Banden mit niedrigem Molekulargewicht zu gewährleisten, und schließen Sie geeignete Ladekontrollen ein.
• Bei IHC-P wird eine starke Färbung des Zellkerns erwartet. Ziehen Sie Protokolle zur Antigen-Retrieval in Betracht und validieren Sie die Spezifität nach Möglichkeit mithilfe von Blockierungspeptiden oder Gewebeproben mit Knockdown-/Knockout-Kontrolle.
• Für ELISA kann der Antikörper in direkten oder Sandwich-Assays verwendet werden. Endanwender sollten jedoch die Beschichtungsbedingungen und Antikörperkonzentrationen entsprechend ihrem spezifischen Versuchsaufbau optimieren.

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