Anti-POLR2D polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - O15514

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: POLR2D-Funktion und Lokalisierung

• POLR2D, auch bekannt als RPB4, RPB16 oder DNA-gerichtete RNA-Polymerase II Untereinheit D, ist eine Kernuntereinheit der RNA-Polymerase II (Pol II), die für die Synthese von mRNA-Vorstufen und nicht-kodierenden RNAs verantwortlich ist.
• Es bildet einen stabilen Subkomplex mit POLR2G/RPB7, der an eine spezifische Tasche bindet, die von den großen Untereinheiten RPB1, RPB2 und RPB6 an der Basis des Pol II-Klemmenelements gebildet wird.
• Der POLR2D/RPB4-POLR2G/RPB7-Subkomplex verriegelt die Klemme über POLR2G/RPB7 in einer geschlossenen Konformation, verhindert so den Eintritt von doppelsträngiger DNA in die aktive Stelle und reguliert damit die Transkriptionsinitiation.
• Dieser Subkomplex besitzt auch Einzelstrang-DNA- und RNA-Bindeaktivität, was zur Prozessivität der Polymerase und zur Stabilisierung des Transkripts beiträgt.
• POLR2D ist ausschließlich im Zellkern lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der DNA-templatgesteuerten Transkription übereinstimmt.
• Laut UniProt ist dieses Protein Teil des Referenzproteoms und wurde durch proteomische Identifizierung und 3D-Strukturstudien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 1-142 umfasst, was der vollständigen POLR2D-Sequenz entspricht. Dieses Design sollte eine hohe Spezifität für das native Protein bieten.
• Angesichts der hohen Sequenzidentität zwischen humanem und murinem POLR2D wird erwartet, dass der Antikörper zuverlässig in Mausproben kreuzreagiert, was durch die Validierung des Lieferanten gestützt wird.
• Der Western Blot (WB) sollte ein deutliches Band bei etwa 16 kDa ergeben; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker zur Größenbestätigung.
• Für die Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine ausschließlich nukleäre Anfärbung zu erwarten; eine Gegenfärbung mit DAPI bestätigt die Kolokalisierung.
• In Immunpräzipitations-Experimenten (IP) kann der Antikörper den POLR2D-POLR2G-Subkomplex herunterziehen, was die Analyse von Pol II-Untereinheiten-Interaktionen ermöglicht.

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