Anti-POLR2A (N-terminal) Kaninchen-mAk für WB, IP, ChIP, ELISA - P24928

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: POLR2A-Funktion und -Lokalisierung

• POLR2A kodiert die größte katalytische Untereinheit der RNA-Polymerase II (Pol II), die mRNA-Vorläufer und viele funktionale nicht-kodierende RNAs unter Verwendung von Nukleosidtriphosphaten als Substrate synthetisiert. Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• Während des Transkriptionsstarts wird Pol II an DNA-Promotoren rekrutiert, und POLR2A bildet mit POLR2B das aktive Zentrum und trägt ein Mg²⁺-koordinierendes DxDGD-Motiv bei, das für die Nukleotidaddition essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474, PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112

• Die einzigartige C-terminale Domäne (CTD) besteht aus 52 Heptapeptid-Wiederholungen und dient als Plattform für die Zusammenstellung von Faktoren, die den Transkriptionsstart, die Elongation, die Termination und die kotranskriptionelle Verarbeitung regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092

• POLR2A zeigt eine intrinsische 3'→5' Exonuklease-Korrekturleseaktivität, die die Entfernung fehleingebauter Nukleotide durch Backtracking und Phosphodiesterbindungsspaltung ermöglicht. Verwandte Referenzen: PMID:8381534

• Die CTD-Phosphorylierung an Ser-5 vermittelt den Promoter-Austritt, während die Ser-2-Phosphorylierung für die Freisetzung aus der Pause während der Elongation erforderlich ist; Methylierung und Acetylierung von CTD-Lysinen feinabstimmen die Genexpressionsniveaus. Verwandte Referenzen: PMID:24207025, PMID:26124092

• Neben der DNA-abhängigen Transkription kann POLR2A als RNA-abhängige RNA-Polymerase fungieren, nicht-kodierende RNAs verlängern und das Genom des Hepatitis-Delta-Virus während der Infektion replizieren. Verwandte Referenzen: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• Das Protein lokalisiert sich im Kern, Zytoplasma und auf Chromosomen, was seine dynamischen Rollen in der Transkription und RNA-Verarbeitung widerspiegelt.

• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und krankheitsassoziierte Varianten in POLR2A wurden mit neurodevelopmentalen Störungen (z. B. NEDHIB) in Verbindung gebracht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen-Ziel (aa550-650) liegt innerhalb der N-terminalen Region und ist über Mensch, Maus und Ratte konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt; erwägen Sie für andere Spezies einen Sequenzabgleich.
• Für Western Blot erwarten Sie einen Band bei ca. 217 kDa; verwenden Sie ein SDS-PAGE-Gel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6 %) und optimieren Sie die Transferbedingungen für hochmolekulare Proteine.
• Bei der Chromatin-Immunopräzipitation (ChIP) validieren Sie die Antikörperspezifität mit positiven und negativen genomischen Loci und optimieren Sie die Vernetzungs- und Scherprotokolle aufgrund der großen Größe des Pol-II-Komplexes.
• Für die Immunopräzipitation (IP) können milde Lysebedingungen und die Einbeziehung einer Nukleasebehandlung die Löslichkeit der chromatingebundenen POLR2A verbessern.
• Der Antikörper ist auch für ELISA geeignet; erwägen Sie die Kombination mit einem Fangantikörper für die Sandwich-basierte Detektion nativer Pol-II-Komplexe.

CamelBio: Ihre One-Stop-Beschaffungsbrücke

CamelBio rationalisiert die Beschaffung von IVD-Rohmaterialien für Diagnostikhersteller und Forschungslabore und bietet validierte Antikörperpaare, optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper sowie Hilfsreagenzien in Bulk. Für die Transkriptions- und RNA-Polymerase-II-Forschung ist dieser Anti-POLR2A (N-terminal) Kaninchen-mAk Teil eines breiteren Portfolios, das wichtige Pol-II-Untereinheiten und Transkriptionsfaktoren abdeckt. Durch sein integriertes Versorgungsnetz unterstützt CamelBio auch bei der Beschaffung von Rohmaterialien für seltene Ziele und hilft Kunden, die Entwicklung von der Konzeption bis zur Klinik zu beschleunigen.