Anti-Podoplanin Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q86YL7

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Podoplanin

• Podoplanin (PDPN, auch bekannt als Aggrus, GP36, T1A) ist ein transmembrane Glykoprotein des Typs I mit extrazellulären, transmembranen und zytoplasmatischen Domänen. Es erfährt alternatives Spleißen und ist stark sialyliert.
• Durch die Bindung an CLEC1B löst Podoplanin die Blutplättchenaktivierung und -aggregation aus, was für die Trennung von Blut- und Lymphgefäßen entscheidend ist (PubMed:14522983, PubMed:15231832, PubMed:17222411). Die Interaktion mit CD9 schwächt diese Aggregation ab (PubMed:18541721). Verwandte Referenzen: PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411 PMID:18541721
• Die Interaktion mit MSN oder EZR fördert die epitheliale-mesenchymale Transition (EMT), die zur ERZ-Phosphorylierung und RHOA-Aktivierung führt und dadurch die Zellmigration und Invasivität erhöht (PubMed:17046996, PubMed:21376833). Verwandte Referenzen: PMID:17046996 PMID:21376833
• Die Bindung von Podoplanin an CD44 fördert die gerichtete Zellmigration in Epithel- und Tumorzellen (PubMed:20962267). Es steuert außerdem die Stabilität von Invadopodien und den Abbau der extrazellulären Matrix über den RHOC-ROCK-LIMK-CFL1-Weg (PubMed:25486435). Verwandte Referenzen: PMID:20962267 PMID:25486435
• In Lymphknoten reguliert Podoplanin die Adhäsion und Kontraktilität fibroblastischer retikulärer Zellen über ERM-Proteine und MYL9-Aktivierung; die Bindung von CLEC1B induziert Relaxation (Nach Ähnlichkeit).
• Podoplanin lokalisiert hauptsächlich zur Plasmamembran und ist angereichert in Membranvorsprüngen: Lamellipodien, Filopodien, Mikrovilli, Falten und Invadopodien. Es wird außerdem zu Membranrafte transportiert und weist apikale/basolaterale Polarität auf.
• Stark exprimiert in Plazenta, Lunge, Skelettmuskel und Gehirn; hochreguliert in kolorektalen Tumoren und einigen oralen Plattenepithelkarzinomen.
• In Keratinozyten führt die Podoplanin-Expression zu einer verlängerten Morphologie, Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts, erhöhter Motilität und verringerter Zelladhäsion (PubMed:15515019). Verwandte Referenzen: PMID:15515019

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 23-131 ab, eine Region innerhalb der extrazellulären Domäne; dieses Design zielt wahrscheinlich auf Epitope ab, die unter nativen und denaturierten Bedingungen zugänglich sind, was die Anwendungen WB und IHC-P unterstützt.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~17 kDa; jedoch können ausgedehnte O-Glykosylierung und Sialylierung dazu führen, dass Banden unter reduzierenden Bedingungen bei 36–44 kDa oder höher erscheinen. Validieren Sie mit geeigneten Positivkontrollen wie Lungen- oder Plazentalysaten.
• Für IHC-P sollten Sie eine Antigen-Retrieval in Betracht ziehen und die Färbung in bekannten positiven Geweben (z. B. Plazenta, Lunge, Tumorschnitten) mit geeigneten Negativkontrollen validieren.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde angegeben; überprüfen Sie jedoch die Sequenzhomologie und erwartete Bandengrößen über die Arten hinweg vor der Verwendung in Experimenten mit mehreren Arten.
• Für ELISA kann das rekombinante Immunogen als Fangstandard dienen; testen Sie die Beschichtungsbedingungen und stellen Sie die Kompatibilität des Detektionsantikörpers sicher.

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