Kaninchen-Polyclonales Anti-PMS2-Antikörper für WB, ELISA - P54278

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PMS2

• PMS2 (PMS1 Protein Homolog 2), auch bekannt als MLH4, ist ein grundlegender Bestandteil des postreplikativen DNA-Fehlerpaarungsreparatursystems (MMR). Es bildet das MutL-Alpha-Heterodimer mit MLH1, das durch die MutS-Alpha-(MSH2-MSH6)- oder MutS-Beta-(MSH2-MSH3)-Komplexe an fehlgepaarte DNA rekrutiert wird. Verwandte Referenzen: PMID:30653781, PMID:35189042
• Nach der Assemblierung des MutL-MutS-Heteroduplex-Ternärkomplexes übt PMS2 seine Endonukleaseaktivität aus, um Einzelstrangbrüche in der Nähe der Fehlpaarung einzuführen, wodurch Eintrittspunkte für die Exonuklease EXO1 entstehen, um den fehlerhaltigen Strang zu entfernen.
• PMS2 besitzt ATPase-Aktivität, obwohl die ATP-Hydrolyse unter bestimmten Bedingungen nicht für eine funktionsfähige Fehlerpaarungsreparatur essenziell ist.
• Über die MMR hinaus ist PMS2 an der DNA-Schadenssignalisierung beteiligt, einem Prozess, der Zellzyklusarrest oder Apoptose als Reaktion auf schwere DNA-Läsionen auslösen kann.
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zellkern, was mit seiner Rolle bei der Erhaltung des Genoms übereinstimmt.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere PMS2-Isoformen, und das Protein unterliegt einer Phosphorylierung, die seine Funktion modulieren kann.
• Keimbahnmutationen in PMS2 sind mit hereditärem nicht-polypösem kolorektalem Karzinom (HNPCC, Lynch-Syndrom) assoziiert, wodurch PMS2 als Tumorsuppressor eingestuft wird.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) des humanen PMS2. Für das Western Blotting ist eine dominante Bande nahe 96 kDa zu erwarten; kleinere Banden können durch Isoformen oder posttranslationale Modifikationen entstehen. Validieren Sie die Detektion in Ihrem spezifischen Probenystem.
• Kreuzreaktivität mit Ratten-PMS2 wurde nachgewiesen. Bei der Arbeit mit anderen Spezies beurteilen Sie die Homologie und führen Sie einen Pilotversuch durch, um die Reaktivität zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungsantigen- und Antikörperverdünnungen empirisch. Fügen Sie geeignete Kontrollen hinzu, um die Spezifität sicherzustellen.
• Aufgrund der Beteiligung von PMS2 an mehreren Komplexen sollten Sie die Möglichkeit von Co-Immunpräzipitationsanwendungen in Betracht ziehen, falls der Antikörper natives Protein erkennt; eine solche Verwendung erfordert jedoch eine gründliche Validierung.

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