Anti-PMS2 Kaninchen monoklonaler Antikörper (KO validiert) für WB und ELISA - P54278

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: PMS2-Funktion und -Lokalisation

• PMS2 (PMS1 protein homolog 2), auch als MLH4, PMS-2, PMSL2, HNPCC4, LYNCH4 oder MMRCS4 bezeichnet, ist eine 96 kDa Mismatch-Repair-Endonuklease, die für die Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität essentiell ist.
• Es ist eine Schlüsselkomponente des post-replikativen DNA-Mismatch-Repair (MMR)-Systems und bildet ein Heterodimer mit MLH1 (MutL alpha). Dieser Komplex wird nach der Erkennung von Basen-Basen-Fehlpaarungen oder Insertions-/Deletionsschleifen durch MutS alpha (MSH2-MSH6) oder MutS beta (MSH2-MSH3) an die Fehlpaarungsstellen rekrutiert. Verwandte Referenzen: PMID:30653781, PMID:35189042
• Nach der Rekrutierung führt die PMS2-Endonukleaseaktivität zu Einzelstrangbrüchen in der Nähe der Fehlpaarung, wodurch Eintrittspunkte für die EXO1-Exonuklease geschaffen werden, um den fehlerhaften Strang abzubauen. DNA-Methylierung lenkt die Spaltung wahrscheinlich auf den neu synthetisierten Strang und gewährleistet so eine strangspezifische Reparatur.
• PMS2 besitzt auch ATPase-Aktivität; jedoch ist die ATP-Hydrolyse möglicherweise nicht für eine effiziente Mismatch-Reparatur erforderlich, da größere Konformationsänderungen fehlen.
• Über die Mismatch-Reparatur hinaus ist PMS2 an der DNA-Schadenssignalgebung beteiligt und fördert den Zellzyklusarrest und die Apoptose als Reaktion auf schwere DNA-Läsionen.
• Das Protein lokalisiert überwiegend im Zellkern, was mit seinen DNA-Reparaturfunktionen konsistent ist, und unterliegt alternativem Spleißen, was zu mehreren Isoformen führt.
• Mutationen in PMS2 werden mit hereditärem nicht-polypösem kolorektalen Karzinom (HNPCC, Lynch-Syndrom) und anderen Mismatch-Repair-Karzinomsyndromen in Verbindung gebracht, was es als Tumorsuppressor klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blotting läuft das Zielprotein bei etwa 96 kDa; erwägen Sie die Verwendung frischer Lysate aus humanen kolorektalen Zelllinien (z.B. HCT116, SW480) als positive Kontrollen und validieren Sie Knockout/Knockdown-Modelle, um die Bandenspezifität zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen wird eine Optimierung des Beschichtungsantigens und der Antikörperkonzentration empfohlen; testen Sie mit rekombinantem humanem PMS2-Protein, um Empfindlichkeit und Linearität zu bewerten.
• Da der Antikörper gegen rekombinantes humanes PMS2-Protein hergestellt wird, wird keine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies erwartet; falls andere Spezies getestet werden sollen, führen Sie eine Sequenzalignierung und Validierung durch.

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