Anti-PLOD2/LH2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – O00469

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PLOD2/LH2

• PLOD2 kodiert für Prokollagen-Lysin,2-Oxoglutarat 5-Dioxygenase 2 (Lysylhydroxylase 2, LH2), ein Mitglied der Lysylhydroxylase-Familie, das Kollagen-Lysinreste modifiziert.
• LH2 katalysiert die Hydroxylierung von Lysinresten in -Xaa-Lys-Gly-Sequenzen innerhalb von Kollagen unter Bildung von Hydroxylysin; diese Hydroxylysine dienen als Bindungsstellen für Kohlenhydrate und sind entscheidend für die Stabilität intermolekularer Kollagenvernetzungen.
• Das Enzym ist an der Membran des rauen Endoplasmatischen Retikulums und im Zytoplasma lokalisiert, wo die kotranslationelle Kollagenmodifikation stattfindet.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in Pankreas und Muskel; Isoformen 1 und 2 sind breit exprimiert, wobei Isoform 2 spezifisch in Haut, Lunge, Dura und Aorta nachgewiesen wird.
• Mehrere Transkriptvarianten kodieren für unterschiedliche Isoformen; posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und Eisen-/Metallbindung, wobei Ascorbat (Vitamin C) als Kofaktor benötigt wird.
• PLOD2 ist mit Krankheitsvarianten verbunden, die mit Osteogenesis imperfecta assoziiert sind, und das Protein dient als Referenzproteom-Komponente bei der Proteomidentifizierung.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 260–380 von menschlichem PLOD2/LH2 (NP_000926.2) abdeckt; bestätigen Sie, dass die Epitopregion in Ihrer Zielisoform und Spezies vorhanden ist.
• Für Western Blot (WB) wird die Verwendung eines reduzierenden Probenpuffers und eines 6–8 % SDS-PAGE-Gels empfohlen, um das ~85 kDa Protein aufzutrennen; erwägen Sie die Optimierung der Antikörperkonzentration zwischen 0,1–1 μg/mL.
• Bei ELISA-Anwendungen können indirekte oder Capture-Formate verwendet werden; validieren Sie die Eignung des Antikörperpaares für Sandwich-Assays bei der Entwicklung quantitativer Tests.
• Kreuzreaktivität ist für Mensch und Ratte nachgewiesen; zusätzliche Speziesreaktivität sollte durch Sequenzalignment der Immunogenregion überprüft werden.
• Führen Sie geeignete Kontrollen durch, einschließlich kollagenproduzierender Zelllinien (z. B. Fibroblasten, Osteoblasten) und Negativkontrollen (z. B. PLOD2-Knockdown- oder Knockout-Lysate).

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