Anti-PLOD1 Kaninchen pAb für WB & ELISA - Q02809

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PLOD1

• PLOD1 kodiert für Lysylhydroxylase 1 (LH1), ein ~84 kDa großes Kollagen-modifizierendes Enzym aus der Familie der 2-Oxoglutarat-abhängigen Dioxygenasen, das für die Kollagenbiosynthese und die Integrität des Bindegewebes essenziell ist.
• Als Teil eines Multiproteinkomplexes mit P3H3 und P3H4 katalysiert PLOD1 die Hydroxylierung von Lysinresten in Kollagen-Alpha-Ketten an den Sequenzen -Xaa-Lys-Gly-.
  Zugehörige Referenzen:
  PMID:10686424
  PMID:15854030
  PMID:8621606
• Die entstehenden Hydroxylysine dienen als Bindungsstellen für Kohlenhydrateinheiten und sind entscheidend für die Bildung stabiler intermolekularer Kollagenquervernetzungen, die die mechanische Festigkeit von Geweben gewährleisten.
• PLOD1 ist an der Membran des rauen Endoplasmatischen Retikulums verankert, wo es Lysin co-translational an neu gebildeten Prokollagenketten hydroxyliert.
• Das Enzym benötigt Eisen und Vitamin C als Kofaktoren und unterliegt einer N-Glykosylierung; Mutationen im PLOD1-Gen verursachen das Ehlers-Danlos-Syndrom Typ VI, eine schwere Bindegewebserkrankung.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, die die Enzymaktivität oder Lokalisation gewebespezifisch modulieren können.
• Die Zielexpression ist besonders stark in kollagenproduzierenden Zellen wie Osteoblasten, Chondrozyten und dermalen Fibroblasten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 19–295) umfasst eine hochkonservierte Region bei PLOD1 von Mensch, Maus und Ratte, was mit der angegebenen Kreuzreaktivität übereinstimmt; für andere Arten wird eine Sequenzalignement-Überprüfung empfohlen.
• Für den Western Blot ist eine Bande nahe 84 kDa zu erwarten; endogenes PLOD1 kann in Lysaten von Fibroblastenzelllinien (z. B. MRC-5, NIH/3T3) oder kollagenreichen Geweben (Haut, Knochen, Sehne) nachgewiesen werden.
• Erwägen Sie die Optimierung der Antikörperverdünnung und Detektionsbedingungen für ELISA, unter Verwendung von rekombinantem PLOD1-Protein oder kollagenstämmigen Peptiden als Beschichtungsantigen.
• Der Antikörper ist polyklonal und kann unterschiedliche Empfindlichkeit und Spezifität aufweisen; vor quantitativen Anwendungen wird eine Validierung im entsprechenden Probensystem empfohlen.

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