Anti-PLK1 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P53350

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PLK1

• Serin/Threonin-Proteinkinase, die mehrere essentielle Funktionen während der M-Phase ausübt, darunter die Regulation der Zentrosomenreifung, Spindelassembly, Entfernung von Kohesinen, Inaktivierung von APC/C-Inhibitoren sowie die Regulation des mitotischen Austritts und der Zytokinese. Zugehörige Referenzen: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Phosphoryliert eine Vielzahl von Substraten (z. B. BORA, BUB1B, CCNB1, CDC25C, FOXM1), indem es vorphosphorylierte Motive über seine Polo-Box-Domänen erkennt, und verstärkt dadurch mitotische Regulatorische Signale. Zugehörige Referenzen: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Schlüsselrolle für Zentrosomenfunktionen und die Assemblierung der bipolaren Spindel; phosphoryliert KIZ, NEDD1 und NINL, um die Rekrutierung des Gamma-Tubulin-Ringkomplexes und die Zentrosomenorganisation zu fördern. Zugehörige Referenzen: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Reguliert den mitotischen Austritt und die Zytokinese via Phosphorylierung von CEP55, ECT2, KIF20A/MKLP2, PRC1 und RACGAP1, wodurch Dockingstellen an der zentralen Spindel für den Rho-GTP-Austauschfaktor ECT2 und die Bildung der Spaltfurche entstehen. Zugehörige Referenzen: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Treibt den G2/M-Übergang durch Phosphorylierung von CDC25C, WEE1, PKMYT1 und CCNB1 voran, was zur CDK1-Aktivierung führt; steigert außerdem die transkriptionelle Aktivität von FOXM1. Zugehörige Referenzen: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Beteiligt an Kinetochorfunktionen und der Schwesterchromatidkohäsion; phosphoryliert BUB1B, FBXO5 und STAG2, um die Kinetochorbindung, den Spindelassembly-Checkpoint und die Kohesindissoziation zu regulieren. Zugehörige Referenzen: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:17617734, PMID:18331714
• Zeigt eine dynamische subzelluläre Lokalisierung: Kern, Zentrosom, Kinetochor, Spindel und Midbody. Wird stark in Plazenta und Dickdarm exprimiert.
• Trägt zudem zur DNA-Schadensreparatur, Kernhülleabbau, Hitzeschockantwort und Zilienbiogenese durch Phosphorylierung verschiedener Zielproteine (z. B. DCTN1, DZIP1, HSF1) bei. Zugehörige Referenzen: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:20679239, PMID:15661742, PMID:18794143, PMID:27979967, PMID:37440612, PMID:37674080

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 304–603 und deckt die C-terminalen Polo-Box-Domänen ab; diese Region ist hoch konserviert, was die Kreuzreaktivität mit PLK1 aus Maus und Ratte unterstützt.
• Für Western Blotting erwarten Sie eine Bande bei etwa 68 kDa; validieren Sie mit passenden positiven und negativen Kontrollen und erwägen Sie die Verwendung von in der Mitose synchronisierten Zelllinien für eine optimale Detektion.
• Bei IHC-P und IF/ICC optimieren Sie die Fixierungs-/Permeabilisierungsbedingungen; PLK1 zeigt eine dynamische Lokalisierung (Zentrosomen, Kinetochore, Midbody), die eine schonende Permeabilisierung erfordern kann, um die Antigenität zu erhalten.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, ist eine Titrierung für jede Anwendung unerlässlich; beginnen Sie mit 1:500–1:2000 für WB und passen Sie je nach Zielabundanz und Detektionsmethode an.
• Für ELISA kann der Antikörper sowohl als Fang- als auch als Detektionsreagenz verwendet werden; eine Paarung mit einem monoklonalen Anti-PLK1 kann die Spezifität in Sandwich-Assays erhöhen.
• Überprüfen Sie die Kreuzreaktivität in Ihrem Modellsystem; obwohl der Antikörper mit Protein aus Mensch, Maus und Ratte reagiert, variieren die Ziel-Expressionslevel je nach Gewebe und Zelllinie.

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