Anti-PLD3 Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q8IV08

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von PLD3

• Proteinidentität und Isoformen: PLD3 (Phospholipase D3) ist eine 5'-3' Exonuklease und BMP-Synthase, kodiert durch das PLD3-Gen. Es ist auch bekannt als Hu-K4, AD19 und SCA46 mit einer Molekularmasse von ~55 kDa.
• Exonukleasefunktion bei der Immunerkennung: Fungiert als lysosomale 5'->3' Exonuklease, die einzelsträngige RNA und DNA hydrolysiert und bevorzugt 5'-Uridin- und Guanosinreste bindet. Es verarbeitet eigene und exogene Nukleinsäuren, um Liganden für Toll-ähnliche Rezeptoren (TLRs) in der angeborenen Immunität zu generieren.
  Zugehörige Referenzen: PMID:30111894, PMID:30312375, PMID:34620855
• Zusammenarbeit mit RNase T2: PLD3 ist teilweise redundant mit PLD4 und kooperiert mit RNASET2 zur Herstellung von 2',3'-cGMP und cytidinreichen RNA-Fragmenten, die die beiden TLR7-Ligandenbindungstaschen besetzen und Rezeptoraktivierung sowie Signalübertragung auslösen.
  Zugehörige Referenzen: PMID:34620855, PMID:38697119
• Verarbeitung von mitochondrialer DNA und viraler RNA: Es baut mitochondriale CpG-reiche ssDNA-Fragmente ab, um TLR9-Aktivierung und autoinflammatorische Reaktionen zu verhindern, während es virale RNA spaltet, um Liganden für die TLR7-Aktivierung zu generieren und antivirale Immunantworten einzuleiten.
  Zugehörige Referenzen: PMID:37225734
• BMP-Synthaseaktivität: Katalysiert die Übertragung einer Glycerolgruppe zwischen Lysophosphatidylglycerol und Monoacylglycerol zur Herstellung von (S,S)-bis(monoacylglycero)phosphat (BMP), einem Phospholipid, das für die Bildung von lysosomalen intraluminalen Vesikeln und den Lipidabbau essentiell ist.
• Subzelluläre Lokalisation: Es befindet sich im Lysosomenlum, an Membranen früher/später Endosomen, an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums und an der Golgi-Apparat-Membran, was seine Rolle im Endolysosomalsystem widerspiegelt.
• Gewebeexpression und Krankheitsrelevanz: Es ist weit verbreitet exprimiert, mit hohen Gehalten im Gehirn (frontaler, temporaler, okzipitaler Kortex, Hippocampus) und niedrigen Gehalten im Corpus callosum. Es ist vorhanden in plasmazytoiden dendritischen Zellen und Monozyten. Mutationen sind mit spinozerebellärer Ataxie und Neurodegeneration assoziiert, was mit seinen Schlüsselwörtern wie Krankheitsvariante, Immunität und Lipidmetabolismus übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein entsprechend den Aminosäuren 279-490 von humanem PLD3 (NP_001026866). Bei Western Blotting ist eine Bande um 55 kDa zu erwarten; verwenden Sie Lysate aus PLD3-exprimierenden Geweben/Zellen von Menschen oder Mäusen, wie Gehirn oder Immunzellen.
• Beachten Sie bei Immunfluoreszenz/ICC, dass PLD3 überwiegend in Lysosomen und Endosomen lokalisiert ist; verwenden Sie eine geeignete Permeabilisierung und Ko-Färbung mit Organellenmarkern.
• Optimieren Sie bei ELISA-Anwendungen die Beschichtungsbedingungen und die Antikörperkonzentration entsprechend dem spezifischen Assay-Format; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem PLD3-Protein als Standard.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, sollte die Chargenkonsistenz überprüft werden; titrieren Sie den Antikörper für jede neue Anwendung.

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