Kaninchen-monoklonaler Antikörper gegen PLC-Gamma-1 (PLCG1) für WB, ELISA - P19174

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von PLCG1

• PLCG1 codiert die Phospholipase C gamma-1, ein Schlüsselenzym, das Phosphatidylinositol-4,5-bisphosphat (PIP2) hydrolysiert und dabei die sekundären Botenstoffe Diacylglycerol (DAG) und Inositol-1,4,5-trisphosphat (IP3) erzeugt, wodurch die intrazelluläre Kalzium- und Proteinkinase-C-Signalübertragung reguliert wird.
• Das Protein wird nachgeschaltet von Rezeptor-Tyrosinkinasen (z. B. PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs) aktiviert und spielt eine entscheidende Rolle bei der durch Wachstumsfaktoren vermittelten Signaltransduktion, indem es Zelloberflächenrezeptoren mit nachgeschalteten Signalkaskaden verbindet.
• PLCG1 ist an der Reorganisation des Aktinzytoskeletts und der Zellmigration beteiligt und lokalisiert sich in dynamischen Zellstrukturen wie Lamellipodien und Membranfalten. Verwandte Referenzen: PMID:17229814
• Neben seiner Lipaseaktivität fungiert PLCG1 als Guaninnukleotid-Austauschfaktor (GEF) für Dynamin-1 (DNM1), erleichtert die GDP-Dissoziation und verstärkt die DNM1-abhängige Endozytose.
• Das Protein enthält regulatorische SH2- und SH3-Domänen, die Wechselwirkungen mit phosphotyrosinhaltigen Proteinen und prolinreichen Motiven vermitteln und zu seinem Zusammenbau in Signalkomplexen beitragen.
• Posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung (an Tyrosin- und Serinresten) und Acetylierung modulieren seine Aktivität und Wechselwirkungen; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• PLCG1 wird ubiquitär exprimiert und ist an verschiedenen Krankheitskontexten beteiligt, darunter Krebserkrankungen und genetische Störungen, bei denen eine gestörte Signalübertragung über diesen Signalweg pathologische Prozesse vorantreibt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einer Region zwischen den Aminosäuren 710–832 des humanen PLCG1, die innerhalb der katalytischen Domäne liegt; diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte hoch konserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot sollten Ganzzelllysate häufig verwendeter humaner Zelllinien (z. B. HeLa, Jurkat, A431) verwendet werden, in denen PLCG1 endogen in moderaten Mengen exprimiert wird; erwartet wird eine Bande von ungefähr 149 kDa.
• Bei der Entwicklung eines ELISA-Tests sollte der Antikörper sowohl in direkten als auch in Capture-Formaten unter Verwendung von rekombinantem Protein oder nativem Zielprotein validiert werden; beachten Sie, dass die Antikörperreaktivität durch die Proteinkonformation und die Probenvorbereitung beeinflusst werden kann.
• Optimieren Sie die Bedingungen für Blockierung und Waschen, um den Hintergrund zu minimieren, da es sich um einen monoklonalen Kaninchenantikörper handelt; für jede neue Anwendung werden Titrationsexperimente empfohlen.

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